背景及概述[1][2]
酵母葡聚糖是一種擁有良好生理功能的免疫調(diào)節(jié)劑(非特異性免疫增強劑),具有增強免疫力、抗腫瘤、抗菌消炎、抗氧化、促進傷口愈合、抗輻射、降低血脂等生理功效。從酵母細胞壁提取得到的酵母葡聚糖是不溶于水的,通過飼料添加劑方式添加在飼料中,能增強動物免疫力,改善動物健康狀況,增加其抗應(yīng)激能力,從而提高生產(chǎn)性能,增加經(jīng)濟效益。
制備[1]
一種可溶性酵母葡聚糖的制備方法。采用本方法制備的酵母葡聚糖可以有效溶于水中,并具有優(yōu)良的免疫活性,同時本方法具有簡便、快速、高效、不使用有機溶劑和強酸、強堿試劑的特點。制備方法,采用機械化學(xué)方法,在固相體系中,通過固態(tài)化學(xué)反應(yīng)對酵母葡聚糖進行化學(xué)修飾和改性。具體過程如下:
(1)將粉末狀酵母葡聚糖原料與固態(tài)小分子修飾試劑按質(zhì)量比1:1~10混合好后,采用機械化學(xué)方法處理4~60min;
(2)將步驟(1)處理后得到的葡聚糖混合物溶于水中得到溶解液,葡聚糖混合物與水的質(zhì)量比為1:5~20;如果產(chǎn)生沉淀,則通過離心除去不溶物,從而得到溶解液;
(3)對步驟(2)得到的溶解液進行透析或超濾,除去多余的修飾試劑,得到酵母葡聚糖溶液。
實施例1:機械化學(xué)法制備磷酸化酵母葡聚糖方案1
酵母葡聚糖與磷酸鈣以質(zhì)量比1:1混合均勻后,采用行星磨進行機械化學(xué)處理,功率為900 W,處理時間為4 min;處理后的酵母葡聚糖混合物以質(zhì)量比1:5溶解于水后,使用離心機在4000 rpm轉(zhuǎn)速下離心20 min,其中42%的酵母葡聚糖溶于水,58%的酵母葡聚糖不溶于水;將溶于水的溶解液用水進行多次透析,以除去多余的磷酸化合物。透析后的酵母葡聚糖濃度為12.1 mg/ml,磷酸基團取代度為0.4%。
本發(fā)明制備方法屬于機械化學(xué)方法,機械化學(xué)是一種不同于熱化學(xué)、電化學(xué)和光化學(xué)的第四種化學(xué)活化形式,是指固體顆粒物質(zhì)在摩擦、碰撞、沖擊、剪切等機械力作用下,使晶體結(jié)構(gòu)及物化性能發(fā)生改變,把機械能高效轉(zhuǎn)化成固體物質(zhì)內(nèi)能,提高固體物質(zhì)化學(xué)活性,反應(yīng)過程只需低反應(yīng)溫度和較低的能量消耗,并且可以實現(xiàn)清潔生產(chǎn)。
應(yīng)用[3]
CN201210444971.6報道了一種酵母葡聚糖銅鑼燒及其制作方法,所述酵母葡聚糖銅鑼燒包括兩片圓盤狀餅皮和夾在兩餅皮間的餡料,采用本發(fā)明制作方法制得的銅鑼燒相對于傳統(tǒng)配方在餅皮中添加了酵母葡聚糖這種功能性成分,使銅鑼燒具有增強免疫力、抗輻射和調(diào)節(jié)血脂的功能,更加營養(yǎng)健康。還可以在配方中加入發(fā)芽米粉與傳統(tǒng)的面粉配合使用,增加維生素、礦物質(zhì)和微量元素,輔助并增強酵母葡聚糖的降血脂作用。也可以輔以其它風味物質(zhì),例如朗姆酒、奶油來調(diào)節(jié)口感,使本發(fā)明的銅鑼燒兼具口感風味和功能性。
檢測方法[4]
一種酵母葡聚糖含量檢測方法,采用高效液相色譜分析(HPLC)進行檢測,HPLC的色譜條件為:采用糖柱或氨基柱,以純化水或乙腈水溶液作為流動相進行等度洗脫,根據(jù)HPLC檢測結(jié)果,獲得酵母葡聚糖含量。
a)繪制標準曲線:準確稱取葡萄糖標準品用水溶解并定容,然后稀釋成不同濃度,用液相色譜分析儀測定得到葡萄糖標準曲線。
b)提?。簩⒋郎y樣品和氫氧化鈉加入純凈水與無水乙醇的混合溶劑中,搖勻后在 沸水浴中加熱;然后立即進行離心,去除上清液,沉淀加入40~50℃的純水中渦旋混勻,去 除上清液,得到供試品;
c)樣品水解處理:將鹽酸溶液加入步驟b)中得到的沉淀中,渦旋、混合均勻,得到 均質(zhì)的懸浮液,然后將懸浮液置于30℃水浴中加熱45分鐘,然后將其放入115℃烘箱中,加 熱1小時,取出后迅速冷卻;將冷卻后的水解液用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至pH 6~7,并加水定容并用濾膜過濾。
d)在與標準溶液相同的色譜條件下,將過膜后的樣品溶液和對照品溶液分別注入 色譜儀中,記錄各色譜峰的保留時間和峰面積。采用保留時間進行定性,峰面積進行定量;
e)計算獲得待測樣品中酵母葡聚糖的含量。
主要參考資料
[1] CN201210336178.4一種可溶性酵母葡聚糖的制備方法
[2] CN201010581329.3 一種獸用酵母葡聚糖注射液
[3] CN201210444971.6一種酵母葡聚糖銅鑼燒及其制作方法
[4] CN201711191160.9 一種添加在蛋白粉中酵母葡聚糖的檢測方法