背景[1-3]
神經元核抗原抗體是以神經元核為抗原多克隆抗體，可以特異性結合神經元核。神經元核抗原抗體主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等神經元核檢測實驗。
抗原與抗體能夠特異性結合是基于抗原決定簇（表位）和抗體超變區(qū)分子間的結構互補性與親和性。這種特性是由抗原、抗體分子空間構型所決定的。除兩者分子構型高度互補外，抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸，才有足夠的結合力。
神經核：在中樞神經系統(tǒng)內，形態(tài)和功能相似的神經元胞體及其樹突聚集在一起形成的灰質團塊，稱為神經核。
在中樞神經系統(tǒng)內由功能相同的多個神經細胞體集聚在一起而形成的集團，叫神經核。人體中樞神經系統(tǒng)內有很多神經核，其中最重要的有發(fā)出12對腦神經的神經核和基底神經核等。各神經核有特殊的生理功能，如發(fā)生病變，則有明顯的臨床體征。
腦神經核團的神經元胞體集群于腦干和脊髓頸段，因神經元的類型或神經纖維包繞程度的差異而得以與其附近的神經元群相區(qū)分。
運動核團：動眼神經核（軀體運動）、滑車神經核、三叉神經運動核、展神經核、面神經運動核、疑核、舌下神經核。
感覺核團：三叉神經中腦核、三叉神經感覺主核。
副交感核：動眼神經副交感核（內臟運動）、上涎核和下涎核、迷走神經背核。
特殊感覺核：前庭神經核、耳蝸神經前、后核、孤束核。
應用[4][5]
用于核膜BK通道調節(jié)神經元核鈣依賴性的基因表達及樹突分支研究
研究發(fā)現(xiàn),神經元核膜BK通道通過影響細胞核周隙的鈣離子釋放,調節(jié)CaMKIV依賴性的細胞核鈣離子信號通路,進而調控神經元活動誘導的CREB轉錄因子的活化,以及下游靶基因的表達,并且影響了神經元樹突分支。
1. 核膜BK通道通過CaMKIV依賴性的細胞核鈣離子信號通路調節(jié)CREB的磷酸化。前期的研究工作提示核膜BK通道能夠調節(jié)CREB轉錄因子的轉錄活性,并且這一作用可能是通過控制細胞核鈣離子濃度來實現(xiàn)的。
2. 于是首先探討了核膜BK通道是否通過細胞核鈣離子信號通路來調控CREB轉錄活性。CREB的轉錄活性受到兩條鈣離子依賴的信號通路的調控,一條是Ca/calmodulin(CAM)-dependent protein kinases通路,特別是定位于細胞核內的CaM kinaseⅣ(CaMKⅣ),另一條是MAP kinase/extracellular signal-regulated kinase(ERK)信號通路。
BK通道的特異性阻斷劑paxilline處理分離的神經元細胞核后,用免疫印跡法檢測到CREB與CaMKIV磷酸化程度比對照組增強,而ERK的磷酸化沒有發(fā)生改變。這提示CaMKIV通路可能介導了核膜BK通道對CREB的轉錄活性的調控作用。
為了排除paxilline可能存在的非特異性作用給實驗結果帶來假陽性,同時在BK通道基因敲除(Kcnmal-/-)小鼠的神經元細胞核上平行做了以上實驗。結果顯示,在Kcnmal-/-小鼠的神經元細胞核,paxilline既沒有改變CREB的磷酸化程度,也沒有改變CaMKIV或者ERK的磷酸化程度。這說明paxilline對分離細胞核的CREB與CaMKIV的磷酸化的調節(jié)作用是特異性地通過BK通道來實現(xiàn)的,而不是通過可能存在的其它非特異性靶點。
參考文獻
[1]Ca V 1 and Ca V 2 Channels Engage Distinct Modes of Ca 2+Signaling to Control CREB-Dependent Gene Expression[J].Damian G.Wheeler,Rachel D.Groth,Huan Ma,Curtis F.Barrett,Scott F.Owen,Parsa Safa,Richard W.Tsien.Cell.2012(5)
[2]Nuclear Calcium-VEGFD Signaling Controls Maintenance of Dendrite Arborization Necessary for Memory Formation[J].Daniela Mauceri,H.Eckehard Freitag,Ana M.M.Oliveira,C.Peter Bengtson,Hilmar Bading.Neuron.2011(1)
[3]BK channel activation:structural and functional insights[J].Urvi S.Lee,Jianmin Cui.Trends in Neurosciences.2010(9)
[4]Channelβ2–4 subunits fail to substitute forβ1 in sensitizing BK channels to lithocholate[J].Anna N.Bukiya,Thirumalini Vaithianathan,Ligia Toro,Alejandro M.Dopico.Biochemical and Biophysical Research Communications.2009(3)
[5]揭威.核膜BK通道調節(jié)神經元核鈣依賴性的基因表達及樹突分支[D].南方醫(yī)科大學,2015.