背景[1-3]
ANTI-C-MYC抗體是一類可以特異性結(jié)合ANTI-C-MYC的多克隆抗體，主要用于檢測(cè)ANTI-C-MYC的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中ANTI-C-MYC水平。用純化的ANTI-C-MYC抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入ANTI-C-MYC，再與HRP標(biāo)記的ANTI-C-MYC抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ANTI-C-MYC呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中ANTI-C-MYC濃度。
c-myc基因是myc基因家族的重要成員之一，c-myc基因既是一種可易位基因，又是一種多種物質(zhì)調(diào)節(jié)的可調(diào)節(jié)基因，也是一種可使細(xì)胞無(wú)限增殖，獲永生化功能，促進(jìn)細(xì)胞分裂的基因，myc基因參于細(xì)胞凋零，c-myc基因與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
C-myc基因的產(chǎn)物為62KD的磷酸化蛋白P62c-mgc，是由C-myc基因的外顯子2和3共同編碼的由439個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)，定位細(xì)胞核內(nèi)，為核蛋白，依C-one編碼產(chǎn)物，功能分類，C-myc癌基因?qū)俸说鞍谆颍哂修D(zhuǎn)化細(xì)胞的能力，并具有與染色體、DNA結(jié)合的特性，在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化及惡性轉(zhuǎn)化中發(fā)揮作用。
C-Myc蛋白在結(jié)構(gòu)上可分為轉(zhuǎn)錄激活區(qū)，非特異DNA結(jié)合區(qū)，核靶序列，堿性區(qū)，螺旋一環(huán)一螺旋(HLH)及亮氨酸拉鏈區(qū)，在已知的轉(zhuǎn)錄因子中可介導(dǎo)蛋白的寡聚化，這兩個(gè)區(qū)同時(shí)存在是C-myc蛋白所特有的，在其它蛋白質(zhì)中，很少發(fā)現(xiàn)。
在C-Myc蛋白中，螺旋一環(huán)一螺旋緊隨著堿性區(qū)，揭示其以特異性序列方式和DNA相互作用。在以原核生物為實(shí)驗(yàn)對(duì)象的研究表明，該堿性區(qū)以一個(gè)自由環(huán)存在，當(dāng)以特殊方式結(jié)合到DNA上時(shí)，則變成螺旋，該區(qū)是C-Myc蛋白與DNA特異序列的結(jié)合部位。
應(yīng)用[4][5]
用于MYC調(diào)節(jié)CHK1和CHK2引起鼻咽癌干細(xì)胞放射抵抗的機(jī)制研究
干細(xì)胞可以通過(guò)優(yōu)先激活CHK1和CHK2的細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn),增加DNA修復(fù)能力從而引起輻射耐受。c-MYC基因是MYC基因家族的重要成員之一,是一種可使細(xì)胞無(wú)限增殖,獲永生化功能,促進(jìn)細(xì)胞分裂的基因,因與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
c-MYC基因的表達(dá)一般與細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)有關(guān),然而在細(xì)胞分化時(shí)c-MYC表達(dá)則降低,發(fā)現(xiàn)c-MYC在細(xì)胞GO期到S期的過(guò)程中也起作用。表明c-MYC表達(dá)的變化與細(xì)胞的增殖及分化狀態(tài)有關(guān),其表達(dá)產(chǎn)物在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化或惡性轉(zhuǎn)化中發(fā)揮作用。
MYC可以通過(guò)抑制p27激活cyclin E/Cdk2使成纖維細(xì)胞靜止。以往的研究還表明,MYC可以同時(shí)激活p53和pten引起正常的和惡性干/祖細(xì)胞的分化,自我更新,及致瘤性。
根據(jù)PKH26熒光染料的特性,識(shí)別具有慢周期特性的PKH26+細(xì)胞,通過(guò)明確c-MYC對(duì)CHK1/2.的直接調(diào)節(jié)作用,闡述PKH26+細(xì)胞具有輻射抗性的機(jī)制,旨在揭示c-MYC介導(dǎo)的DNA損傷修復(fù)在鼻咽癌放療抵抗中的作用。
參考文獻(xiàn)
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