EW-7197是一種TGF-βI型受體(TGF-βR I,又稱為ALK5)小分子抑制劑，可以靶向拮抗TGF-β介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)，發(fā)揮抑癌效應(yīng)。近年研究發(fā)現(xiàn)，EW-7197還可以在肝臟、腎臟和肺等多器官纖維化動物模型中發(fā)揮拮抗纖維化的作用，但目前尚缺乏EW-7197拮抗結(jié)膜組織瘢痕化的研究。
作用機制[1]
EW-7197是一種新型的TGF-β通路小分子抑制劑，作用靶點是TGF-βR I(又稱為ALK5)，通過競爭性結(jié)合于ALK5胞內(nèi)激酶結(jié)構(gòu)域的ATP結(jié)合位點產(chǎn)生激酶抑制活性,從而能夠阻斷TGF-β1誘導(dǎo)的Smad2/Smad3蛋白磷酸化及入核，減少TGF-β通路下游與組織纖維化及上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial -mesenchymal transition,EMT)相關(guān)靶基因的表達。EW-7197起初被發(fā)現(xiàn)可以抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲、遷移以及EMT過程，近年來還被證實具有拮抗肝臟、腎臟、肺等器官動物模型纖維化的作用。諸如Park等研究發(fā)現(xiàn)，EW-7197可以通過阻斷TGF-β1/Smad2/3信號傳導(dǎo)，降低不同器官纖維化小鼠模型中組織內(nèi)膠原蛋白、α-SMA、纖連蛋白等的表達，從而發(fā)揮抗纖維化作用，延長動物模型的生存周期。
Binabaj等則證實，EW-7197在潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型中可以發(fā)揮拮抗結(jié)直腸組織纖維化的作用，其機制與靶向抑制TGF- β1/Smad2/3通路，下調(diào)促纖維化基因表達，減少膠原組織在結(jié)直腸中的過度沉積有關(guān)。雖然在上述器官中，EW-7197展現(xiàn)了較好的抗纖維化效應(yīng)，但目前尚缺乏其在眼部拮抗組織纖維化的研究。在溫佳敏等人的研究中，將EW-7197添加至TGF-β1誘導(dǎo)后的HTFs培養(yǎng)基中，發(fā)現(xiàn)可以呈濃度和時間梯度降低HTFs的細(xì)胞增殖能力。此外，使用6.0umol/L作用濃度的EW-7197還可以顯著減弱HTFs的細(xì)胞遷移能力，初步在細(xì)胞實驗水平證實了EW-7197可能具有抑制青光眼濾過術(shù)后瘢痕化的作用。
制備方法[2]
向反應(yīng)瓶中依次加入中間體1-e(7.99g,30mmol)、甲基叔丁基醚80.0mL，攪拌10min，降溫至-5~5℃，向體系中滴加60%的乙二醛二甲縮醛水溶液(60mmol)，滴加過程控溫-5~5℃。滴完后,保溫反應(yīng)1h。再向體系中分批加入氯化銨(3.54g,66mmol)，加完后，室溫反應(yīng)5h，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH=7~8，用二氯甲烷萃取兩次(每次100mL)，有機相用水洗滌，分液，干燥，(40~50℃,-0.08MPa~-0.05MPa)濃縮干；濃縮物加入乙腈(濃縮物重量:乙腈體積=1g:6mL)并加熱到50~55℃，煮洗0.5h，過濾，濾餅真空烘箱(50℃,-0.08MPa)烘干，得淡黃色固體產(chǎn)品(9.17g,25.2mmol)，收率84%。
氮氣保護下，向反應(yīng)瓶中依次加入中間體1-f(7.01g,20mmol)，醋酸20mL，攪拌10min，升溫至70~75℃，保溫反應(yīng)5h，減壓濃縮醋酸，剩余物用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH=7~8，用二氯甲烷萃取兩次(每次100mL)，有機相用水洗滌，分液，干燥，(40~50℃,-0.08MPa~-0.05MPa)濃縮至干；濃縮物加入石油醚(濃縮物質(zhì)量:石油醚體積=1g:3mL)并攪拌0.5h，過濾，濾餅真空烘箱(50C,-0.08~-0.07MPa)烘干，得淡黃色固體產(chǎn)品EW-7197(5.78g，19mmol)，收率95%。
參考文獻
[1]溫佳敏,鄭磊,艾偉鵬. EW-7197對TGF-β1誘導(dǎo)人Tenon囊成纖維細(xì)胞增殖和遷移的影響及機制[J]. 國際眼科雜志,2023,23(10):1617-1620. DOI:10.3980/j.issn.1672-5123.2023.10.03.
[2]陜西萊特光電材料股份有限公司. 雙酮類化合物的制備方法和咪唑類衍生物的制備方法:CN202011197429.6[P]. 2022-05-06.