"3D4/21 Adherent豬肺泡巨噬細胞系
細胞背景資料：肺泡巨噬細胞；SV４０轉(zhuǎn)化；Landrace
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
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細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳?。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
M-1 myeloid leukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
GM03671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
細胞生長特性：貼壁
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
NCl-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
SW 1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞
TPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
SKMES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
BHT-101細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
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MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
4T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
HEK-AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞
Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
N-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
hTERT-RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
NCIH2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
LY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
TNC-1B12B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
3D4/21 Adherent豬肺泡巨噬細胞系
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
CW2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
BAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
TYKnu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1915細胞、OVSAHO細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞
H-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞
TMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU3細胞、MBVP細胞、HT144mel細胞
PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、NCIH1385細胞、MAD109細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、SNU251細胞、ARO 81-1細胞
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