"3D4/21 epithelioid cells豬肺泡巨噬細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:肺泡巨噬細(xì)胞;SV40轉(zhuǎn)化;Landrace 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 NCI-SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-9細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、SNU423細(xì)胞 PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞 HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 3D4/21 epithelioid cells豬肺泡巨噬細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞 SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞 Vero 76 clone E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞 NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC893細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞 HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 3D4/21 epithelioid cells豬肺泡巨噬細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞 SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞 ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞 H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細(xì)胞、mREC細(xì)胞、HEC151細(xì)胞 DK-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-12T細(xì)胞、NRCC細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞 751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NEP-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞 NTERA2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11TKB細(xì)胞、H378細(xì)胞、BT-549細(xì)胞 Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細(xì)胞、UACC812細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞 J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞 FHL124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT0404細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞 3D4/21 epithelioid cells豬肺泡巨噬細(xì)胞系 OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞 TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞 NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞 HSAEC1-KT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-403細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞、H-1623細(xì)胞 Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞 SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞 SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞 PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞 T-HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞 TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞 JROECL 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATOIII細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞 NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞 Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat 77細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞 Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞 NCIH810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2126細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞、LS513細(xì)胞 NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、CORL279細(xì)胞 HM06.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H847細(xì)胞、H2029細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞 HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞 A 172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A427細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞 SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞 WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞 CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞 SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞 RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞 SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞 Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞 Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞 CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞 H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞 hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞 RPE1-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞 MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞 UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞 PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞 ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞 B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞 CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞 HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細(xì)胞、KE39細(xì)胞、SW-756細(xì)胞 Balb/c 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞 HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞 J774 A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細(xì)胞、F-81細(xì)胞、MCA205細(xì)胞 VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞 H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞 SKG-IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞 IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞 SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞 MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞 National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞 H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞 Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞 3D4/21 epithelioid cells豬肺泡巨噬細(xì)胞系 NCI-ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞 Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞 0V-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780S細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、Kelly細(xì)胞 ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞 "
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