肌酐(Cr)檢測試劑盒(PA速率微板法)
產(chǎn)品簡介：
肌酐(creatinine,Cr)是人體或動物肌肉內(nèi)代謝的產(chǎn)物，每20g肌肉代謝可產(chǎn)生約1mg肌酐，由腎小球濾過排出體外，外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物，內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物。
肌酐(C)檢測試劑盒(PA速率微板法)檢測原理是血清、血漿、尿液中的肌酐與苦味鹽反應(yīng)，生成橘紅色的苦味鹽肌酐復(fù)合物的反應(yīng)速率，選擇適宜的速率監(jiān)測時間，避開干擾物質(zhì)對肌酐與苦味鹽反應(yīng)的干擾，通過分光光度比色法（酶標儀）測定510m處吸光度，可用于測定人體、動物的血漿、血清、尿液樣品中肌酐含量。
該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成：
自備材料：
1、酶標儀、96孔板、恒溫箱或水浴鍋
2、蒸餾水
操作步驟(僅供參考)：
1、準備樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，-20℃凍存。如果尿液中肌酐含量較高，可用蒸餾水作1：10~100稀釋后再測定。一般不建議稀釋倍數(shù)過高，否側(cè)導致吸光度差值較小。
2、配制標準品工作液：按肌酐標準(10mmo/兒)：肌酐標準稀釋液=1：49的比例混合，使?jié)舛冗_到200μmol/兒，即為標準品工作液-肌酐標準(200μmol/L)。4℃保存1周有效。
3、配制Cr顯色工作液：取Cr顯色液和Cr Assay Buffer等量混合，室溫放置20min,即為Cr顯色工作液。
4、C加樣：按照下表設(shè)置標準孔、測定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的Cr濃度過高，可以適當稀釋10~100倍后再進行測定。
注意：對于某些干擾物較多的樣品，可以提高肌酐標準的工作濃度以減少誤差，如配制濃度為300~400μmol/兒的肌酐標準進行測定，其計算公式中應(yīng)相應(yīng)×300~400，而不是×200。一般先加標準品和待測樣品，再加入Cr顯色工作液后準確計時、讀數(shù)。
- Cr測定：反應(yīng)溫度37℃，充分混勻后準確反應(yīng)20s，酶標儀測定510nm吸光度，讀取各孔吸光度(A標準1、A測定1)；待反應(yīng)進行至準確60S，再讀取各孔吸光度(A標準2、A測定2)。
注意：采用酶標儀測定時，一般建議用臨床生化分析儀，手工或半手工操作有可
能不準確，或者測定效果不佳。
計算:
肌酐(mol/L)=(A測定2-A測定1)/(A標準2-A標準1)×200×N
式中：
A測定1=反應(yīng)20s測定孔的吸光度
A測定2=反應(yīng)60s測定孔的吸光度
A標準1=反應(yīng)20s標準孔的吸光度
A標準2=反應(yīng)60s標準孔的吸光度
N=樣本稀釋倍數(shù)
參考區(qū)間：
注意事項:
1、由于本產(chǎn)品檢測方法屬于速率法，其全程反應(yīng)時間在2~3mn左右，反應(yīng)較快，因此測定的關(guān)鍵點在檢測時間，一定注意操作時間，否則結(jié)果會顯示不出差異。
2、該PA速率法線性范圍可達2000μmol/兒，樣本濃度過高時應(yīng)稀釋后再測定。
3、測定各孔時，待測樣品、標準品溫度均需達到室溫，否則影響結(jié)果。
4、輕度溶血樣本對肌酐測定無影響。
5、一次性不宜同時測定過多樣本，避免因長加入試劑時間導致測定結(jié)果的不準確。建議在加入樣品后，最多一次性加入2~3個管的C”顯色工作液，如采用排槍，可適當增加一次性加入的管數(shù)。
6、一般尿液肌酐含量較高，如果顯色后吸光度仍超過本法的線性范圍（即2000μo/兒），可用蒸餾水稀釋10~100倍后再重新進行測定。
7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
8、試劑開封后請盡快使用，以防影響后續(xù)實驗效果。
有效期:12個月有效，常溫運輸，按要求存儲。
附錄:參考標準曲線范圍：雅吉測定肌酐標準在200μmol/兒時，通過酶標儀505nm測定60s與20s的吸光度差值大多在0.02~0.05之間.Leagene測定肌酐標準在0、50、100、200、300、400μmol/L的差值，據(jù)此作出其標準曲線如下：
