小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞是取自小鼠睪丸間質(zhì)的上皮細(xì)胞樣貼壁細(xì)胞，小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞在LH作用下cAMP產(chǎn)量升高，但對(duì)促卵泡激素沒(méi)有響應(yīng)。小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞對(duì)LH的響應(yīng)持續(xù)時(shí)間與血清批次有關(guān)；在LH存在下，小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞可以代謝膽固醇。生長(zhǎng)培養(yǎng)基：DMEM/F12＋5%HS＋2.5%FBS＋1%P/S，培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%，溫度：37℃。

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2、加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10S的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。