雙(2-氰乙基)-N,N-二異丙基亞磷酰胺是一個無色液體有機磷化合物。通常用作核酸化學(xué)合成中的重要試劑。它可以用作DNA和RNA合成中的亞磷?；噭部捎糜诠滔嗪铣煞磻?yīng)中。

合成應(yīng)用

1、專利CN202211394746.6實施例3的步驟8)將G7溶解在4L二氯甲烷中,室溫下將雙(2-氰乙基)-N,N-二異丙基亞磷酰胺(1.5eq.)和四氮唑(1.5eq.)加入到反應(yīng)液中室溫攪拌3小時,TLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后,將1.2eq.的碘吡啶溶液加入到反應(yīng)液中。TLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束后反應(yīng)液分別用5%的硫代硫酸鈉溶液,飽和碳酸氫鈉溶液,飽和食鹽水洗滌后將有機相濃縮。粗品溶解在10倍體積的甲醇/濃氨水(1:1)中,室溫反應(yīng)14小時,監(jiān)測反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后濃縮,粗品裝載到DEAESephadex柱上,使用0-1.0M的TEAB洗脫液線性梯度洗脫。濃縮得中間體G。反應(yīng)路線流程，如下方方程式[1]。

2、專利CN202310283482.5提供了一種花菁類熒光標(biāo)記物、其合成方法和應(yīng)用,該標(biāo)記物的核苷單元與五甲川類花菁之間以碳鏈連接,極大提高了化學(xué)穩(wěn)定性,實現(xiàn)了一類新型熒光探針的系列化制備。其中，實施例2步驟b):將1.1g化合物3溶于10mL無水二氯甲烷中,冰水浴下加入2.1mL無水二異丙基乙基胺和1.2g雙(2-氰乙基)-N,N-二異丙基亞磷酰胺，室溫下避光攪拌過夜。反應(yīng)結(jié)束后濃縮除去溶劑,加入50mL乙酸乙酯和50mL水洗滌,有機相再以70mL水洗滌。粗產(chǎn)品濾除干燥劑后濃縮至2-20mL,氮氣保護下逐滴加入到700mL正庚烷中,滴加同時攪拌。過濾收集固體,得到深藍(lán)色粉末(化合物4)670mg,收率55%[2]。

3、專利CN202310091020.3實施例2步驟3，配28mL的四氮唑的乙腈溶液(0.4mmol/mL)待用。將化合物2-4(2.8g)加入到上述溶液中,然后將化合物2-5雙(2-氰乙基)-N,N-二異丙基亞磷酰胺(2.26g)在室溫25℃下加入到該溶液中,置換氨氣三次,反應(yīng)液在室溫25℃下攪拌1小時。點板監(jiān)測顯示反應(yīng)完全。反應(yīng)液在冰水浴下冷卻到10℃以下,滴加碘的吡啶/四氫呋喃/水的溶液(0.5mmol/ml,吡啶:四氫呋喃:水=1:8:1)直到反應(yīng)液不褪色,點板監(jiān)測顯示氧化反應(yīng)完成。隨后反應(yīng)液中加入10mL飽和亞硫酸鈉水溶液淬滅,再加水稀釋。用乙酸乙酯萃取三次,合并有機相后用無水硫酸鈉干燥,過濾。加適量硅膠和DCM拌樣、純化(40g正相柱,EA,10min,DCM:MeOH,10-20%20min,流速30ml/min)。濃縮得到白色泡沫狀固體2-6(3.1g,93.5%收率)[3]。

參考文獻

[1]江蘇申基生物科技有限公司. 一種核糖環(huán)修飾的mRNA帽類似物及其制備方法和應(yīng)用:CN202211394746.6[P]. 2023-05-23.

[2]北京超精核酸科技有限公司. 花菁類熒光標(biāo)記物、其合成方法和應(yīng)用:CN202310283482.5[P]. 2023-06-23.

[3]深圳瑞吉生物科技有限公司,武漢瑞佶生物科技有限公司. 一種用于核酸的5’端加帽的化合物及其應(yīng)用:CN202310091020.3[P]. 2024-07-23.