3-羥基苯硫酚（3-HTP）的分子式為C6H6OS，結(jié)構(gòu)中含羥基（-OH）和硫酚基（-SH），是3-巰基苯硼酸（3-MPBA）的還原產(chǎn)物，通過硫醇基團(tuán)（-SH）與金納米花（GNFs）表面結(jié)合（通過Au-S鍵）。在883 cm?1處有特征拉曼峰，可作為定量檢測的信號(hào)峰，區(qū)別于3-MPBA的996 cm?1峰，兩者的強(qiáng)度比（I883/I996）隨黃嘌呤濃度增加而增大。

3-羥基苯硫酚

用于信號(hào)探針功能

黃嘌呤氧化酶（XOD）催化黃嘌呤生成過氧化氫，H2O2進(jìn)一步將3-MPBA還原為3-羥基苯硫酚，伴隨883 cm?1拉曼峰的出現(xiàn)，而3-MPBA的996 cm?1峰強(qiáng)度保持3-巰基苯硼酸通過Au-S鍵固定在金納米花@二氧化硅（GNFs@Si）表面后，與H?O?反應(yīng)生成3-巰基苯硼酚，其特征拉曼峰（883 cm?1）的強(qiáng)度隨H?O?濃度增加而增強(qiáng)，而3-MPBA的996 cm?1峰強(qiáng)度穩(wěn)定，形成比率信號(hào)I883/I996，有效消除基底不均勻性帶來的信號(hào)波動(dòng)，實(shí)現(xiàn)高精度定量檢測。將生物分子（黃嘌呤）的濃度轉(zhuǎn)化為可檢測的拉曼信號(hào)變化，構(gòu)建“黃嘌呤→H?O?→3-HTP”的信號(hào)放大通路。

檢測性能與優(yōu)勢

基于金納米花的強(qiáng)表面增強(qiáng)效應(yīng)，傳感器對黃嘌呤的檢測限低至5.7 nM，線性范圍覆蓋10 nM至1000 nM，優(yōu)于多數(shù)傳統(tǒng)方法（如電化學(xué)、熒光法）。盡管次黃嘌呤等干擾物可微弱激活信號(hào)，但3-羥基苯硫酚的特征峰強(qiáng)度變化顯著高于干擾物，結(jié)合比率法，確保對黃嘌呤的特異性識(shí)別。在人血清檢測中，加標(biāo)回收率達(dá)97.80%–105.74%，與高效液相色譜（HPLC）結(jié)果一致，證明其在復(fù)雜生物基質(zhì)中的可靠性。

作用機(jī)制

3-羥基苯硫酚通過硫醇基團(tuán)（-SH）與 GNFs 表面的 Au-S 鍵穩(wěn)定結(jié)合，利用金納米花的“熱點(diǎn)”效應(yīng)增強(qiáng)拉曼信號(hào)。GNFs的粗糙表面和局域表面等離子體共振（LSPR）特性，使拉曼信號(hào)增強(qiáng)近3個(gè)數(shù)量級(jí)，顯著提升檢測靈敏度。區(qū)別于傳統(tǒng)雙探針策略，拉曼信號(hào)來自同一分子的氧化還原轉(zhuǎn)化，避免雙探針標(biāo)記的復(fù)雜性和成本，同時(shí)通過內(nèi)參比峰（996 cm?1）抵消基底不均一性，使信號(hào)重現(xiàn)性的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）降至 2.62%–2.77%[1]。

參考文獻(xiàn)

[1]Yan W ,Rongnan Y ,Honghui Z , et al.A ratiometric SERS sensor with one signal probe for ultrasensitive and quantitative monitoring of serum xanthine.[J].The Analyst,2023,148(22):