超靈敏度化學(xué)發(fā)光液試劑盒是化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)，也稱為超敏型ECL發(fā)光液，用于檢測(cè)固定在膜上的蛋白或核酸，靈敏度高，背景低，檢測(cè)靈敏度可達(dá)高飛克(femtogram)級(jí)，適用于檢測(cè)痕量蛋白或核酸。

檢測(cè)原理

超靈敏度化學(xué)發(fā)光液試劑盒用于檢測(cè)直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶（HRP）的抗體、抗原或者核酸。蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上，以HRP標(biāo)記的抗體或探針結(jié)合膜上的目的蛋白或核酸，洗膜后置于用本產(chǎn)品配制的ECL工作液中，室溫孵育數(shù)分鐘，HRP使工作液中的魯米諾（Luminol）氧化并發(fā)光，試劑中添加的增強(qiáng)劑可以使得這種發(fā)光大大增強(qiáng)。此光經(jīng)X光膠片或者電子裝置感光記錄下來，可清晰顯示蛋白質(zhì)或核酸條帶。

使用方法

1.印跡膜制備：執(zhí)行常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記的抗體或者HRP標(biāo)記的核酸探針孵育、洗膜；ECL工作液含有HRP催化的發(fā)光底物，檢測(cè)系統(tǒng)必須基于HRP酶標(biāo)記的抗體或者核酸探針。充分的洗滌對(duì)于降低背景非常重要，所有步驟均在室溫下完成。

2.ECL工作液的配置：在使用前取等量A液和B液，混合均勻并盡快使用；將膜片置混合液中，于室溫下孵育約1分鐘，每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2 ml以覆蓋全膜片，注意不要在膜片表面形成氣泡。

3.蛋白或核酸信號(hào)顯現(xiàn)：

1).用平頭鑷鉗住膜片，垂直置于吸水紙上以吸去過量試劑，僅留下少量液體覆蓋表面，不可讓膜完全干燥；

2).將膜片置于保鮮膜上，吸附蛋白面朝上，小心趕盡氣泡；

3).用電子裝置感光，或在暗室中用X光片曝光；

4).根據(jù)信號(hào)強(qiáng)弱適當(dāng)調(diào)整曝光時(shí)間，也可選擇不同時(shí)間多次曝光，以取得更佳效果。