背景[1-3]
毛癬菌通用PCR試劑盒是一種用于檢測毛癬菌的生物試劑盒,通過聚合酶鏈式反應(PCR)技術對樣本進行檢測。以下是該試劑盒的基本信息:
組成:毛癬菌通用PCR試劑盒通常包括PCR反應液、酶標板、標準品等組成部分。
特點:該試劑盒具有高特異性、高靈敏度、快速檢測等特點。通過對毛癬菌基因組特定片段進行擴增,可以有效區(qū)分不同種類的毛癬菌,且檢測限可達到10ng/ml左右的人基因組DNA。此外,試劑盒還采用了酶標板等優(yōu)質材料,確保了檢測的準確性和可靠性。
用途:毛癬菌通用PCR試劑盒適用于對各類樣本進行毛癬菌檢測,如頭皮屑、皮膚等。該試劑盒可廣泛應用于醫(yī)學、生物學等領域,為皮膚科醫(yī)生、研究人員等提供有力的檢測工具。
使用方法:使用毛癬菌通用PCR試劑盒時,需要按照說明書的步驟進行操作。通常包括樣本處理、PCR擴增、酶標板檢測等環(huán)節(jié)。操作簡便,一般人員經(jīng)過培訓即可熟練掌握。
毛癬菌通用PCR試劑盒
毛癬菌通用PCR試劑盒的操作步驟如下:
1.樣本采集:從患者體內采集血液、糞便、組織等樣本,并將其保存在無菌容器中。
2.DNA提取:將采集到的樣本進行DNA提取,通常采用柱式或磁珠式DNA提取試劑盒。提取后的DNA應保存在-20°C或更低的溫度下。
3.PCR反應體系準備:根據(jù)毛癬菌通用PCR試劑盒說明書的要求,配制PCR反應體系,包括引物、熒光探針、dNTPs、DNA聚合酶等。
4.PCR反應:將提取的DNA加入到PCR反應體系中,進行PCR反應。反應條件和時間根據(jù)試劑盒說明書的要求進行設置。
5.結果分析:將PCR反應后的產(chǎn)物進行熒光信號檢測,根據(jù)熒光信號的出現(xiàn)情況判斷是否存在毛癬菌的感染。
應用[4-5]
毛癬菌通用PCR試劑盒可以用于紅色毛癬菌鑒定和種內分型
紅色毛癬菌是(Trichophyton rubrum)是皮膚癬菌病最常見的致病真菌,常引起皮膚、毛發(fā)和指趾甲感染。據(jù)統(tǒng)計可導致皮膚癬菌病中90%的慢性難治性感染。在臨床和流行病學研究上,不僅快速、準確的菌種鑒定非常必要,而且確定復發(fā)和再感染有時更為必要,但目前依然缺乏特別簡單而準確的手段。所以有必要建立一種快速準確而簡單的菌種鑒定和種內分型的方法。
目的:1.以改良KANE/PISCHER皮膚癬菌鑒定系統(tǒng)對皮膚癬菌進行培養(yǎng)鑒定,建立一種適宜的皮膚癬菌標準化鑒定系統(tǒng)。2.建立一種快速、簡單、重復性強的紅色毛癬菌種內分型方法。材料和方法:1.用改良KANE/FISCHER皮膚癬菌鑒定系統(tǒng)對福建沿海某部隊采取的69株皮膚癬菌和北京大學第一醫(yī)院真菌中心保藏的皮膚癬菌ATCC株和臨床株13株進行培養(yǎng)鑒定。2.對其中的63株紅色毛癬菌用毛癬菌通用PCR試劑盒擴增其核糖體非轉錄間隔區(qū)(NTS)的兩個串聯(lián)重復亞單位TRS-1和TRS-2區(qū),進行種內分型。
毛癬菌通用PCR試劑盒結果:1.改良KANE/FISCHER鑒定系統(tǒng)基本可以快速、準確、可靠鑒定紅色毛癬菌到種的水平。2.利用TRS-1和TRS-2區(qū)PCR產(chǎn)物的特征性帶型,可將63株紅色毛癬菌分為8型。
結論:1.改良KANE/FISCHER鑒定系統(tǒng)對常見的皮膚癬菌能達到種的鑒定,可作為標準化鑒定方法。對紅色毛癬菌和須癬毛癬菌的鑒定較傳統(tǒng)的鑒定方法更準確、更迅速。2.毛癬菌通用PCR試劑盒PCR方法產(chǎn)生的特征性的指紋圖提供了一種快速、穩(wěn)定、簡便的分子生物學種內分型方法,可應用于紅色毛癬菌感染的流行病學研究。
參考文獻
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