介紹

放線菌素D(Actinomycin D)是19世紀(jì)40年代Waksman等人從土壤微小鏈霉菌(Streptomyces parvullus)中發(fā)現(xiàn)并分離的多肽類抗生素。此后，又從鏈霉菌屬的多個種中發(fā)現(xiàn)了放線菌素D。例如灰色鏈霉菌(S.griseus)，弗氏鏈霉菌(S.fradiae)，抗生鏈霉菌(S.antibioticus)，金羊毛鏈霉菌(S.chrysomallus)等[1]。

圖一 放線菌素D

應(yīng)用

放線菌素D起初研究時表現(xiàn)出抗菌活性。但在研究的進(jìn)一步發(fā)展過程中，放線菌素D展現(xiàn)出優(yōu)良的抗腫瘤活性，在治療某些惡性腫瘤的臨床醫(yī)學(xué)方面收到良好的成效，因此，當(dāng)前放線菌素D主要作為抗癌藥物被應(yīng)用。它對一些病原菌如革蘭氏陽性細(xì)菌具有相當(dāng)強(qiáng)的抗性，在抗菌藥物的研究上也呈現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景[2]。

制備

黃小龍等人[3]提供了一種珊瑚共生鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)放線菌素D的方法，具體步驟為：稱取1g珊瑚樣品(采自海南文昌海域)，用10毫升無菌海水進(jìn)行研磨，再用無菌海水稀釋10倍、100倍、1000倍，分別吸取100μl稀釋液，涂布分離培養(yǎng)基平板上，在28℃的恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)1～4周。根據(jù)平板上菌落的形態(tài)特征，用無菌竹簽挑出平板上的放線菌菌落進(jìn)行純化。將鏈霉菌HNM0560接種100ml種子培養(yǎng)基。28℃、180rpm培養(yǎng)96小時，得到種子液。在500ml的三角瓶中裝200ml發(fā)酵培養(yǎng)基。在發(fā)酵培養(yǎng)基中接種2ml種子液，28℃、180rpm培養(yǎng)7天，收獲發(fā)酵液。將1升發(fā)酵液用3層紗布過濾，得到菌體。將菌體用200ml丙酮浸提(室溫過夜靜置)，再用3層紗布過濾并收集濾液，減壓蒸干得粗浸膏，即為放線菌素D粗提物。將放線菌素D粗浸膏經(jīng)LH?20凝膠柱色譜分離(80％的甲醇水溶液洗脫)，得到放線菌素D。

該方法發(fā)酵穩(wěn)定、化合物分離工藝簡便。所述的放線菌素D對羅非魚無乳鏈球菌活性具有較強(qiáng)的抑制活性，提供了該化合物新的活性。鏈霉菌HNM0560具有很好的工業(yè)化潛力與應(yīng)用前景。

參考文獻(xiàn)

[1]張利莉,萬傳星,羅曉霞等. 放線菌素D的制備方法及其應(yīng)用[P]. 新疆維吾爾自治區(qū)：CN104450580B,2020-08-04.

[2]王立巖,盧小杰,李曉帆等. 一種使用超臨界流體色譜制備放線菌素D和X-2方法[P]. 廣東?。篊N112010942B,2022-05-17.

[3]黃小龍,周雙清,黃東益等. 珊瑚共生鏈霉菌、發(fā)酵生產(chǎn)放線菌素D的方法及應(yīng)用[P]. 海南?。篊N113528388A,2021-10-22.