背景及概述^[1][2]

對氨水楊酸又叫對氨基水楊酸、4-氨基水楊酸。對氨水楊酸化學名為4-氨基-2-羥基苯甲酸，熔點為135-145℃，是抗結(jié)核分枝桿菌的藥物，對氨水楊酸可以延緩結(jié)核分枝桿菌對異煙肼和鏈霉素耐藥性的產(chǎn)生，其作用機制可能為抑制葉酸合成(但對抗葉酸化合物無增效作用)并/或抑制細胞壁分枝桿菌生長素的合成，使結(jié)核分枝桿菌的鐵攝入減少，從而達到抑菌作用。對氨水楊酸僅對分枝桿菌有效，單獨應用時結(jié)核桿菌能迅速產(chǎn)生耐藥性，因此本品必須與其他抗結(jié)核藥合用。

應用^[2-3]

CN201310504566公開了對氨基水楊酸異煙肼的制備方法，對氨基水楊酸異煙肼為異煙肼與對氨水楊酸的化學合成物，黃色結(jié)晶性粉末。該品中對氨水楊酸能有效地延緩和阻滯了異煙肼在體內(nèi)的乙?；^程，使在血液中維持較高、較久的異煙肼濃度，其療效相當于或優(yōu)于異煙肼加大劑量對氨水楊酸，或相當于鏈霉素加異煙肼混合治療的療效，且胃腸道反應、肝功能損害和白細胞減少等不良反應發(fā)生率顯著低于異煙肼。因此，對氨基水楊酸異煙肼的抗結(jié)核療效顯著優(yōu)于異煙肼。制備步驟為：1)分別量取水和有機溶劑，混合；將對氨水楊酸和異煙肼加入到水和有機溶劑的溶媒中，加熱攪拌；2)冷卻養(yǎng)晶，過濾得對氨基水楊酸異煙肼；所述有機溶劑為碳原子數(shù)小于或等于6的有機酯類。本發(fā)明采用簡便易行的工藝條件，在水與酯類兩相溶媒體系中，低成本高效率實現(xiàn)了對氨基水楊酸異煙肼的制備。通過本方法制備的對氨基水楊酸異煙肼，含量高于99%，且外觀晶型好、色澤正，穩(wěn)定性好。本方法反應操作單元少、工藝過程簡單、耗時短、生產(chǎn)成本低和環(huán)保，操作簡單，實施過程易控，耗時短，適合工業(yè)化生產(chǎn)對氨基水楊酸異煙肼。

CN201710784370公開一種乙氧酰胺苯甲酯的制備方法，乙氧酰胺苯甲酯，化學名為2-乙氧基-4-乙酰胺基苯甲酸甲酯，又名依索巴或球蟲 酯，是廣譜抗球蟲獸藥和重要的飼料添加劑。首先將對氨基水楊酸、對甲苯磺酸，將其溶解于甲醇中形成混合液，加入反應瓶中，并攪拌均勻后升溫，保溫反應；將對氨基水楊酸甲酯反應液、醋酸鈉，將醋酸鈉加入反應液中，控制反應液pH、溫度，加入乙酰化酶，反應得到對乙酰氨基水楊酸甲酯；將對乙酰氨基水楊酸甲酯加于丙酮中，加熱，滴加硫酸二乙酯，滴完后反應即得乙氧酰胺苯甲酯。該方法能夠?qū)崿F(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，該方法可實現(xiàn)資源節(jié)約、環(huán)境友好，更能夠節(jié)約成本，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定且收率高，適合大規(guī)模工業(yè)化穩(wěn)定生產(chǎn)。

分析方法^[2]

而對氨水楊酸中的雜質(zhì)硝基苯屬于2B類致癌物，雖然目前已有GC-MS檢測硝基苯的方法，但是沒有檢測對氨水楊酸中極低限度硝基苯(0.8ppm)的方法，因此急需提供一種靈敏度更高的GC-MS檢測法來更精準的確保對氨水楊酸及其制劑的質(zhì)量可控，并最終確定產(chǎn)品的安全有效。

CN201910809655.6提供一種GC-MS分離測定對氨水楊酸中相關(guān)雜質(zhì)的方法，該方法能準確的分離檢測對氨水楊酸中的硝基苯，且操作簡單、分離度好、專屬性強、靈敏度高，能精準的確保對氨基水楊酸及其制劑的質(zhì)量可控，并最終確定產(chǎn)品的安全有效。

1.配置內(nèi)標溶液：取間硝基甲苯對照品適量，用二氯甲烷溶解并定量稀釋制成每1ml中約含40ng的溶液。

2.配置供試品溶液：取供試品0.25g，精密稱定，置20ml具塞玻璃管中，加入0.4mol/L的氫氧化鈉水溶液5ml使溶解，搖勻，加入內(nèi)標溶液5ml，振搖1分鐘，使混合均勻，靜置，使分層，去掉上層溶液(水層)，在下層(二氯甲烷層)中加入0.5g無水硫酸鈉，振搖并靜置，取上清液適量，即得供試品溶液。

3.配置對照品溶液：取硝基苯對照品適量，精密稱定，用內(nèi)標溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含40ng的溶液，精密量取5ml，置20ml具塞玻璃管中，加入0.4mol/L的氫氧化鈉水溶液5ml使溶解，振搖1分鐘，使混合均勻，靜置，使分層，去除上層溶液(水層)，在下層(二氯甲烷層)中加入0.5g無水硫酸鈉，振搖并靜置，取上清液適量，即得對照品溶液，色譜圖如圖3所示。

4.分別取供試品溶液與對照品溶液1μl直接進樣，記錄色譜圖，出峰順序依次為硝基苯和間硝基甲苯。供試品溶液中硝基苯與間硝基甲苯峰面積的比值不得大于對照品溶液中硝基苯與間硝基甲苯峰面積的比值(0.00008％)。

結(jié)果

1.如圖1所示，空白溶劑不干擾硝基苯和內(nèi)標的測定。

2.如圖2所示，內(nèi)標不干擾硝基苯的測定。

3.如表2所示，對照品溶液與內(nèi)標溶液峰面積的比值說明進樣重復性良好。

表2

4.如表3所示，硝基苯檢測限為12.2ng/ml，相當于對氨基水楊酸的0.24ppm的雜質(zhì)能被檢出，信噪比大于5。

表3

主要參考資料

[1]CN201310504566.3一種對氨基水楊酸異煙肼的制備方法

[2] [中國發(fā)明] CN201910809655.6 GC-MS分離測定對氨基水楊酸中相關(guān)雜質(zhì)的方法

[3] [中國發(fā)明] CN201710784370.2 一種乙氧酰胺苯甲酯的制備方法