甲基丙二酸 (Methylmalonic acid，MMA)是一種二羧酸，是丙二酸的甲基化衍生物，丁二酸（琥珀酸）的同分異構(gòu)體。生物體內(nèi)，甲基丙二酸與輔酶A通過(guò)硫酯鍵結(jié)合成甲基丙二酰輔酶A，再通過(guò)甲基丙二酰輔酶A變位酶異構(gòu)化為琥珀酰輔酶A（維生素B12為輔酶），以這種方式進(jìn)入三羧酸循環(huán)，這是有機(jī)體回補(bǔ)反應(yīng)之一。

甲基丙二酸在血液中的濃度通常由氣相色譜法或質(zhì)譜法測(cè)得，在健康人中為73-271 nmol/L。甲基丙二酸血癥是先天性有機(jī)酸代謝異常中最為常見(jiàn)的疾病之一，屬于常染色體隱性遺傳病。該病常見(jiàn)的臨床癥狀表現(xiàn)為嗜睡、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、發(fā)作性嘔吐、脫水、呼吸困難、肌張力低下，少見(jiàn)癥狀還包括智力低下、肝大和昏迷等。自1967年首次報(bào)道該病以來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者采用不同的方法對(duì)患者體液中MMA進(jìn)行了定性定量分析，以便為臨床確診提供技術(shù)服務(wù)。

一種特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度和靈敏度高、分析時(shí)間短的檢測(cè)血液中甲基丙二酸含量的方法如下：

步驟1：用移液器移取標(biāo)品和內(nèi)標(biāo)溶液，渦旋儀混勻；同時(shí)平行移取待測(cè)樣本和內(nèi)標(biāo)溶液渦旋混勻；

步驟2：向上述混合液中加入基質(zhì)溶液(4％的牛血清蛋白溶液或空白血清溶液)，渦旋混勻；

步驟3：加入PH＜7的小極性醚進(jìn)行萃取，充分混勻并高速離心；

步驟4：取部分上清液，于氮吹儀上氮?dú)獯蹈桑?/p>

步驟5：加入衍生試劑(飽和的酸性醇溶液)，渦旋混勻，密封，加熱65℃，20min衍生；

步驟6：衍生完成后再次加熱吹干溶劑；

步驟7：加入流動(dòng)相復(fù)溶液復(fù)溶(含1-5‰甲酸銨或乙酸銨的醇水溶液或乙腈水溶液，醇水溶液或乙腈水溶液中醇或乙腈的體積百分比濃度為20-80％)，充分混勻；

步驟8：經(jīng)超聲萃取一段時(shí)間后，充分混勻并高速離心；

步驟9：取上清溶液，由液相自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣，經(jīng)液相色譜柱的色譜分離，經(jīng)質(zhì)譜分析，最終定量分析血液或尿液中甲基丙二酸(MMA)的含量。