"DK-MG Cell|人膠質(zhì)母細胞瘤細胞

細胞背景資料：膠質(zhì)母細胞瘤；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機不能過大，風(fēng)機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。

細胞生長：貼壁

A-10細胞類似產(chǎn)品：：Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞

ATN1細胞類似產(chǎn)品：：NOR 10細胞、Vero E-6細胞、COLO320DM細胞

Rat-2細胞類似產(chǎn)品：：KMS18細胞、H-1155細胞、SKNFI細胞

BT-325細胞類似產(chǎn)品：：SNU601細胞、SNU-354細胞、Hepatoma 22細胞

LSC-1細胞類似產(chǎn)品：：D341細胞、SK-Col-1細胞、RPMI-8226S細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

DK-MG Cell|人膠質(zhì)母細胞瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

PANC0203細胞類似產(chǎn)品：：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞

PAMC82細胞類似產(chǎn)品：：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞

LS 174T細胞類似產(chǎn)品：：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞

KYSE180細胞類似產(chǎn)品：：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

PANC0203細胞類似產(chǎn)品：：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞

PAMC82細胞類似產(chǎn)品：：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞

LS 174T細胞類似產(chǎn)品：：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞

KYSE180細胞類似產(chǎn)品：：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

TOV112細胞類似產(chǎn)品：：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞

MALME 3M細胞類似產(chǎn)品：：A204細胞、HaCaT細胞、MDCK II細胞

MGH-U1 (EJ)細胞類似產(chǎn)品：：Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞

HIT-T15細胞類似產(chǎn)品：：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞

HARA-B細胞類似產(chǎn)品：：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞

SUP-B1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞

Ly10細胞類似產(chǎn)品：：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞

SNU-C2B細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞

Embryonic Bovine Tracheal cells細胞類似產(chǎn)品：：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞

MT-4細胞類似產(chǎn)品：：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞

DK-MG Cell|人膠質(zhì)母細胞瘤細胞

JKT1細胞類似產(chǎn)品：：Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞

GM00637H細胞類似產(chǎn)品：：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞

H2081細胞類似產(chǎn)品：：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞

Hs 888Lu細胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞

L cells (TK-)細胞類似產(chǎn)品：：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞

RPVSMC細胞類似產(chǎn)品：：SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞

RPVSMC細胞類似產(chǎn)品：：SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞

786-0WT細胞類似產(chǎn)品：：PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞

ONS76細胞類似產(chǎn)品：：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞

Dysplastic Oral Keratinocyte細胞類似產(chǎn)品：：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞

VCaP細胞類似產(chǎn)品：：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞

IOSE-Mar細胞類似產(chǎn)品：：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞

COLO 320DM細胞類似產(chǎn)品：：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞

MCF-7/ADR細胞類似產(chǎn)品：：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞

MH-22a細胞類似產(chǎn)品：：High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞

OE21細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞

Onda 11細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞

Panc08.13細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞

NCI-H1869細胞類似產(chǎn)品：：LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞

H841細胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞

JG細胞類似產(chǎn)品：：SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞

Pt K1細胞類似產(chǎn)品：：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞

H-1915細胞類似產(chǎn)品：：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞

PLMVEC細胞類似產(chǎn)品：：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞

D6P2T細胞類似產(chǎn)品：：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞

OCI Ly19細胞類似產(chǎn)品：：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞

HFF-1細胞類似產(chǎn)品：：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞

HLEC-B3細胞類似產(chǎn)品：：MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞

DK-MG Cell|人膠質(zhì)母細胞瘤細胞

HEK 293-EBNA細胞類似產(chǎn)品：：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞

Hs 578T細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞

A375-SM細胞類似產(chǎn)品：：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞

RASMCs細胞類似產(chǎn)品：：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞

SW 1417細胞類似產(chǎn)品：：OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞

Mono Mac6細胞類似產(chǎn)品：：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞

SK-LMS-1細胞類似產(chǎn)品：：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞

Beta-TC-6細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞

Beta-TC-6細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞

OCIAML3細胞類似產(chǎn)品：：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞

MHCC-LM3細胞類似產(chǎn)品：：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞

ARH-77細胞類似產(chǎn)品：：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞

MM-1S細胞類似產(chǎn)品：：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞

SNU5細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞

NCI-H1437細胞類似產(chǎn)品：：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞

HBZY-1細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞

PG-4(S+L-)細胞類似產(chǎn)品：：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞

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