"NTERA-2 Cell|人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞

細胞背景資料：畸胎瘤；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

L-540細胞類似產(chǎn)品：：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞

SK-MEL-1細胞類似產(chǎn)品：：BV173細胞、SNU1細胞、HLFa細胞

HR8348細胞類似產(chǎn)品：：DHL10細胞、QGY7701細胞、293-FT細胞

MONO-MAC 6細胞類似產(chǎn)品：：H-2135細胞、Colo-678細胞、NuTu 19細胞

HT 1080.T細胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細胞、H2591細胞、MILE SVEN1細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NTERA-2 Cell|人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

OV1/P細胞類似產(chǎn)品：：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞

P3HR1細胞類似產(chǎn)品：：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞

H1666_DA細胞類似產(chǎn)品：：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞

LS-411細胞類似產(chǎn)品：：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

OV1/P細胞類似產(chǎn)品：：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞

P3HR1細胞類似產(chǎn)品：：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞

H1666_DA細胞類似產(chǎn)品：：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞

LS-411細胞類似產(chǎn)品：：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

SUP-M2細胞類似產(chǎn)品：：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞

WSU-HN13細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞

201T細胞類似產(chǎn)品：：Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞

NBL-4細胞類似產(chǎn)品：：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞

MRMT-1細胞類似產(chǎn)品：：HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞

REC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞

H-2342細胞類似產(chǎn)品：：HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞

SUDHL-2細胞類似產(chǎn)品：：LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞

HNEpC細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞

SF-126細胞類似產(chǎn)品：：HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞

NTERA-2 Cell|人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞

NCIH2591細胞類似產(chǎn)品：：KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞

Vero 76 clone E6細胞類似產(chǎn)品：：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞

C4-1細胞類似產(chǎn)品：：IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞

HSMC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞

210RCY3-Ag1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞

BLO11細胞類似產(chǎn)品：：H508細胞、H522細胞、C918細胞

BLO11細胞類似產(chǎn)品：：H508細胞、H522細胞、C918細胞

HCC-78細胞類似產(chǎn)品：：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞

SKG-3a細胞類似產(chǎn)品：：TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞

TCam-2細胞類似產(chǎn)品：：SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞

H2052_MM細胞類似產(chǎn)品：：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞

HPaSteC(HPSC)細胞類似產(chǎn)品：：C3H-10T1/2細胞、MyLa 2059細胞、HEL-92細胞

TGBC11TKB細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞

MNNG/HOS Cl #5細胞類似產(chǎn)品：：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞

LM(TK-)細胞類似產(chǎn)品：：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞

UMNSAH/DF#1細胞類似產(chǎn)品：：SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞

ANA1細胞類似產(chǎn)品：：C-127細胞、KBM7細胞、H-2081細胞

NCI-H719細胞類似產(chǎn)品：：Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞

DHL5細胞類似產(chǎn)品：：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞

MSB-1細胞類似產(chǎn)品：：WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞

P31 FUJ細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞類似產(chǎn)品：：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞

CHP 212細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞

KU 19-19細胞類似產(chǎn)品：：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞

CDC/EU.HMEC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞

NCIH1184細胞類似產(chǎn)品：：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞

U251MG細胞類似產(chǎn)品：：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞

HuT-78細胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞

WEHI3B細胞類似產(chǎn)品：：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞

NTERA-2 Cell|人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞

TMD8細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞

SNU-668細胞類似產(chǎn)品：：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞

Hs 766細胞類似產(chǎn)品：：SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞

H-4細胞類似產(chǎn)品：：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞

MADB106細胞類似產(chǎn)品：：JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞

BLO-11細胞類似產(chǎn)品：：3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞

SN12CPM6細胞類似產(chǎn)品：：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞

HCT8細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞

HCT8細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞

CAL-85-1細胞類似產(chǎn)品：：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞

MONO-MAC 6細胞類似產(chǎn)品：：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞

D-283細胞類似產(chǎn)品：：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞

TERT-RPE1細胞類似產(chǎn)品：：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞

MESSA細胞類似產(chǎn)品：：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞

NCIH1793細胞類似產(chǎn)品：：D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞

U-266細胞類似產(chǎn)品：：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞

Hs27細胞類似產(chǎn)品：：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞

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