"MDBK Cell|牛腎細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

CCC-HPF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：rHSC-99細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞

HDQ-P1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT.116細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞

IGROV 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HDF-a細(xì)胞、K1735細(xì)胞、GDM1細(xì)胞

AX-Mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCMK-1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞、IGROV細(xì)胞

Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2342細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

MDBK Cell|牛腎細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

Tregs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Epstein-Barr-3細(xì)胞、SCC9細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞

HT-1197細(xì)胞類似產(chǎn)品：：766T細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞

SNU668細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞

RPE1-hTERT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

Tregs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Epstein-Barr-3細(xì)胞、SCC9細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞

HT-1197細(xì)胞類似產(chǎn)品：：766T細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞

SNU668細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞

RPE1-hTERT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

769P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AHH1細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、H-1770細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞

NCIN87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞

SW839細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞

T173細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞

MNNG/HOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞

ME1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞

Glioma 261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞

3T3J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞

WM-2664細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mahlavu細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞

MDBK Cell|牛腎細(xì)胞

Cates 1B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP2細(xì)胞、67NR細(xì)胞、A549細(xì)胞

Granta-519細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMS13細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞

CD 18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU1919細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞

RWPE-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞

Rat Fetal Lung-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞

Panc-03.27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞

Panc-03.27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞

HCC1937細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JROECL 21細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞、DMS53細(xì)胞

WM115細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NE1細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞

GB1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞

BIC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、SW-756細(xì)胞、ONS76細(xì)胞

FCCH1018細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞

Ramos 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞

Tu 177細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP-4細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞、H-82細(xì)胞

N2a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞

766T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞

HPAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞

NTera 2/cl.D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞

Namalva細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞

Cloudman S91 melanoma細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞

RH-35細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2452細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞、H498細(xì)胞

MHCC 97-H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞

ST486細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GalK1細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞、CHP100細(xì)胞

A-704細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞

Wistar Institute-38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞

SK Mel 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 5細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞、SW-579細(xì)胞

V 79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Liver-02細(xì)胞、LS 123細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞

SNU886細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞

C4-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE80UBC細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞

MDBK Cell|牛腎細(xì)胞

A-431細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞

A 72細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞

Ku812F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞

0V-1063細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞

8226/S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LCD細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞、293細(xì)胞

COLO-679細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞

CCLP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞

GT39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI.H460細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞

NCI-H647細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞

SVGp12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2066細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、TE354T細(xì)胞

SupB15WT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞

TE-32細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3-Jiyoye細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞

HuTu 80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT483細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞

Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PAI細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞

U266S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞

H-4-II-E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞

32Dcl3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH3T3細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞

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