"Lu-65 Cell|人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿(mǎn)器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

HCFB（HCF）細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞

SW1088細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P3X63NS1細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、CEF細(xì)胞

CCRF/CEM-C7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SLMT-1細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、H-1694細(xì)胞

RFL-6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNUC2B細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、HN6細(xì)胞

CMT-167細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C4-I細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞、HANK1細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

Lu-65 Cell|人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿(mǎn)培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿(mǎn)的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類(lèi)型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

HB611細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞

X63Ag8-653細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞

293A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞

PTK-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：１０傳代

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

HB611細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞

X63Ag8-653細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞

293A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞

PTK-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來(lái)相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過(guò)150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過(guò)低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以?xún)?nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

MV522細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞

COLO 320 HSR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞

HBE135-E6E7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞

F-36P細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hepa 1-6細(xì)胞、NB9細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞

ECV細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞

CPAE細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OSRC2細(xì)胞、LS411細(xì)胞、SW48細(xì)胞

HCC-2218細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞

SCC9細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞

Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：THP 1細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞

HEK293-A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞

Lu-65 Cell|人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

H1623細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCILY7細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞

OsA-CL細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE11細(xì)胞、TE6細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞

U14細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IFRS1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞、H-1838細(xì)胞

PAN 02細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MFM-223細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞

JROECL 33細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞

H-2081細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞

H-2081細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞

LM3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞

OUMS27細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Tu-177細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞

NCI-H1568細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞

HCMEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C4-2B細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞

293S細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞

NL20SV細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞

TGW細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞

NIH:OVCAR3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞

UCH-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞

Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：QBC(939)細(xì)胞、JB 6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞

RCC 786-O細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞

IMCD-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H2009細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞

Hs683細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞

H2228細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞

149 PT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞

SK Col 1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞

HN-6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ANA-1細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞、OSA細(xì)胞

FU-97細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞

CORL279細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞

SW620細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞

HLEpiC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞

CEM-T4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA-MB 468細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞

Lu-65 Cell|人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

ECC-10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞

MCF-7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MONO-MAC 6細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、LS 513細(xì)胞

95D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞

OB2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞

mIMCD3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BC-023細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞

SUM-159-PT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、SW1271細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞

HCC94細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC-2218細(xì)胞、AN-3細(xì)胞、H2227細(xì)胞

U87MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞

U87MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞

NCIH1648細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞

A2780細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RMG1細(xì)胞、Sf21細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞

HCoEpiC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞

NCI-H1792細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞

TOV112D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MKN7細(xì)胞、EB1細(xì)胞、HIC細(xì)胞

SGC7901細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Daoy細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞

H7721細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞

KMS-11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NOR10細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、BT細(xì)胞

"