"AN3-CA Cells(贈送Str鑒定報告)|人子宮內膜腺癌細胞

細胞背景資料：AN３CA細胞建系于１９６４年。它衍生于子宮內膜癌患者淋巴結轉移組織，具有癌細胞的基本特性，能在體外長期傳代培養(yǎng)，接種實驗動物產生明顯腫瘤。但細胞的生物學特性及超微結構尚未深入研究，僅發(fā)現(xiàn)該細胞系促黑激素合成為陰性。細胞常用于人子宮內膜癌細胞生物學及其相關特性研究。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數期。

細胞生長：貼壁

CAL51細胞類似產品：：MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞

IMR90細胞類似產品：：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞

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AN3-CA Cells(贈送Str鑒定報告)|人子宮內膜腺癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

細胞傳代方法：１：２傳代

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HCC 94細胞類似產品：：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

AN3-CA Cells(贈送Str鑒定報告)|人子宮內膜腺癌細胞

細胞生長特性：貼壁生長

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C-28/I2細胞類似產品：：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞

細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇HAO的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得Zui多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調節(jié)HAO酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。YOU點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。別適用那些貼壁不是別緊，又別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。

HM細胞類似產品：：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞

SCCVII/St細胞類似產品：：Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞

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