"RKO-AS45-1細胞：人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用，近年來細胞學蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進展，細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜，需要的實驗設備種類繁多，下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細胞操作時，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月，對于不需要長期凍存的細胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機：細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞，所以需要配置低速的常溫離心機，對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材：細胞實驗中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
T-HEECs細胞系相關產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
AtT 20細胞系相關產(chǎn)品：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
NCI-H2106細胞系相關產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
NCIH64細胞系相關產(chǎn)品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
NL-20細胞系相關產(chǎn)品：RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
MCF/Adr細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
NCI-460細胞系相關產(chǎn)品：CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞
RPMI 8226細胞系相關產(chǎn)品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid細胞： No. 18細胞
CC-LP-I細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
H-2081細胞系相關產(chǎn)品：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
CV1細胞系相關產(chǎn)品：OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
LM6細胞系相關產(chǎn)品：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞
MOLM16細胞系相關產(chǎn)品：16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
VP229細胞系相關產(chǎn)品：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
RC-4B細胞系相關產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
RC-4B細胞系相關產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
EM3細胞系相關產(chǎn)品：WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
SK-N-F1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
SW-900細胞系相關產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
H1963細胞系相關產(chǎn)品：SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
JIMT-1細胞系相關產(chǎn)品：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
H295R細胞系相關產(chǎn)品：Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞
VB細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
NHEK細胞系相關產(chǎn)品：MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
BE(2)-C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
SV-HUC-1細胞系相關產(chǎn)品：Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞
MDA231-LM2細胞系相關產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
H345細胞系相關產(chǎn)品：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
HT細胞系相關產(chǎn)品：WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞
SK-N-MC細胞系相關產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
WEHI3B細胞系相關產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
MONO-MAC 6細胞系相關產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
SKLU01細胞系相關產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
H446細胞系相關產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
OV 1063細胞系相關產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
SCC 25細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關產(chǎn)品：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
GL-261細胞系相關產(chǎn)品：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
HEC151細胞系相關產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
HBL1細胞系相關產(chǎn)品：U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞
769-P細胞系相關產(chǎn)品：143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
RTE細胞系相關產(chǎn)品：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
NCIH2110細胞系相關產(chǎn)品：CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞
High Five細胞系相關產(chǎn)品：KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞
TE13細胞系相關產(chǎn)品：H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
8305-C細胞系相關產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
Kit225 K6細胞系相關產(chǎn)品：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關產(chǎn)品：WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞
SW-1783細胞系相關產(chǎn)品：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
GM02132C細胞系相關產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
253J B-V細胞系相關產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
AR41P細胞系相關產(chǎn)品：SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
BT.549細胞系相關產(chǎn)品：H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
LNCaP細胞系相關產(chǎn)品：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
A549 ATCC細胞系相關產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
22Rv1細胞系相關產(chǎn)品：MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞
NL20SV細胞系相關產(chǎn)品：MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
RGC-5細胞系相關產(chǎn)品：B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
RCC-10細胞系相關產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
SNT-8細胞系相關產(chǎn)品：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
NCI-H378細胞系相關產(chǎn)品：WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
NCI-H748細胞系相關產(chǎn)品：ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
NU-GC-3細胞系相關產(chǎn)品：MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞
SW-1417細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
LWnt3A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
Caco2BBe細胞系相關產(chǎn)品：Tn-5B1-4細胞、SK-MEL-31細胞、H841細胞
SW403細胞系相關產(chǎn)品：V-79細胞、EC-109細胞、LS174細胞
NCI-H2106細胞系相關產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、B16細胞、H2073細胞
Leydig細胞系相關產(chǎn)品：Colon-26細胞、A498細胞、CCD-1095Sk細胞
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