"MDCK-II細胞：犬腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，３-４天傳１次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明：成纖維細胞：來自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時，細胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因，尚無定論，出現(xiàn)過好幾種理論與假說，其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?，F(xiàn)象，常見的細胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中，因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導(dǎo)致一部分細胞死去，稱為細胞的病理死亡，或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細胞死亡；細胞毒性是由細胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細胞死亡機理，如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況，一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡，是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程，無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說，都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用，在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
SK-ES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
NALM-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
IBRS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
GM346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE­8.1/2細胞、HDMEC細胞
SW-954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
C-33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
D-341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
BEL-7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
HCC-1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
Caki2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
OCI-Ly01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
COLO 320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
HIT T-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
NPA-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
ABE­8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
KM933細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
SUDHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
VeroE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細胞、IMR-90細胞、CEM-C7細胞
HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 116細胞、H-1341細胞、SCC-4細胞
SK-ES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細胞、GM2132細胞、SU-DHL-5細胞
U-2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、2780CP細胞
"