"BIU-87 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
BIU-87 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞生長:貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BIU-87 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
Hx147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
NCIH226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細胞、NCI H345細胞、Swiss/3T3細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細胞、KOPN-8細胞、NFHIOSE-29細胞
NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
OC-3-VGH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
3T3-A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
BIU-87 Thawing人膀胱癌細胞系
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
KYSE0410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
SKCO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
U-CH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
G422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
NS-1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
KAT-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
MV4II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
LA-795細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
MDAMB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞
HUTU80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞
BC-3-H-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
HEK293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
BIU-87 Thawing人膀胱癌細胞系
BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
Ca-Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
NCIH1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞
NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
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