"WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
H-2228細胞系相關產(chǎn)品：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品：Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
HKC細胞系相關產(chǎn)品：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
NCl-H157細胞系相關產(chǎn)品：BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
HeLa.S3細胞系相關產(chǎn)品：ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
PMVEC細胞系相關產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
DMS114細胞系相關產(chǎn)品：LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
SK LU 1細胞系相關產(chǎn)品：EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
H341細胞系相關產(chǎn)品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
SK Hep1細胞系相關產(chǎn)品：D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
TK-1細胞系相關產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
OVCA-420細胞系相關產(chǎn)品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
OKa-C-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
KU 812F細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8226S細胞、LS-174T細胞、H4-IIE-C3細胞
NCIH69細胞系相關產(chǎn)品：RD 2細胞、Panc 08.13細胞、P3J.HR1K細胞
RBL.2H3細胞系相關產(chǎn)品：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
HEC-251細胞系相關產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
WM115-mel細胞系相關產(chǎn)品：L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
HT 29細胞系相關產(chǎn)品：TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關產(chǎn)品：LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
LC-2/ad細胞系相關產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
RD-2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
ZR7530細胞系相關產(chǎn)品：Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞
MC3T3E1細胞系相關產(chǎn)品：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞
WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細胞系
MOLT3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
LAN5細胞系相關產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
MDAMB-231細胞系相關產(chǎn)品：KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞
WRL 68細胞系相關產(chǎn)品：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
NIH3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
MCF-7ADR細胞系相關產(chǎn)品：Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
Huh-7.5.1細胞系相關產(chǎn)品：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
SW837細胞系相關產(chǎn)品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
Hs 739.T細胞系相關產(chǎn)品：U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
NCIH1666細胞系相關產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
SCC090細胞系相關產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
McA-RH 7777細胞系相關產(chǎn)品：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
DU 4475細胞系相關產(chǎn)品：WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
NCIH2291細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞
3-LL細胞系相關產(chǎn)品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
H-2171細胞系相關產(chǎn)品：H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
CAL 78細胞系相關產(chǎn)品：SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
MSF細胞系相關產(chǎn)品：H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
QGP 1細胞系相關產(chǎn)品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
GM02219C細胞系相關產(chǎn)品：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
CAL-120細胞系相關產(chǎn)品：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
NCI-H2347細胞系相關產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
H2085細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
X63細胞系相關產(chǎn)品：MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
TE 32細胞系相關產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
MS1細胞系相關產(chǎn)品：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
EJ-1細胞系相關產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
HEK-293-H細胞系相關產(chǎn)品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
PC-14細胞系相關產(chǎn)品：SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
CHP-212細胞系相關產(chǎn)品：RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
RS(4;11)細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細胞系
HCT_116細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
SF-763細胞系相關產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
Hs 742.T細胞系相關產(chǎn)品：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
PG-4 S+L-細胞系相關產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
MUTZ-1細胞系相關產(chǎn)品：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
Co320細胞系相關產(chǎn)品：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
LAN-5細胞系相關產(chǎn)品：GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
SHIN3細胞系相關產(chǎn)品：HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞
NCI-Hut 125細胞系相關產(chǎn)品：R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞
KNS42細胞系相關產(chǎn)品：MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
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