"HEC-1-A Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料：這株細胞及其亞株HEC-１-B是H.Kuramoto及其同事１９６８年從一位IA期子宮內(nèi)膜癌患者身上分離得到的。PAF可以誘導其c-fos的表達。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HEC-1-A Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長滿
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因導入細胞內(nèi)，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEC-1-A Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產(chǎn)品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
V79-GalK1細胞系相關產(chǎn)品：GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關產(chǎn)品：QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
NCIH1693細胞系相關產(chǎn)品：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
NOK細胞系相關產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
NCI-H2110細胞系相關產(chǎn)品：E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞
RPPVEC細胞系相關產(chǎn)品：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞
KBM7細胞系相關產(chǎn)品：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
H-2405細胞系相關產(chǎn)品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
U14細胞系相關產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
AG 9細胞系相關產(chǎn)品：Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞
Panc-10.05細胞系相關產(chǎn)品：OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
RCM1細胞系相關產(chǎn)品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
Calu-6細胞系相關產(chǎn)品：GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
L 428細胞系相關產(chǎn)品：SNU475細胞、NCI-H2198細胞、ssMCF7細胞
GS-9L細胞系相關產(chǎn)品：BC-028細胞、Ly10細胞、NRCC細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
UWB1.289細胞系相關產(chǎn)品：118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
NBL-S細胞系相關產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
OCI/AML-2細胞系相關產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
OCI/AML-2細胞系相關產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
RAW264.7細胞系相關產(chǎn)品：SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
LNT-229細胞系相關產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
IHHA-1細胞系相關產(chǎn)品：G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
MDA-453細胞系相關產(chǎn)品：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
HEC-1-A Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
RBMEC細胞系相關產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
MPP-89細胞系相關產(chǎn)品：Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關產(chǎn)品：EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
HIT-T15細胞系相關產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
BHK21細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
H2087細胞系相關產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
NP69SV40T細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
WM451Lu細胞系相關產(chǎn)品：HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
LIPF178C細胞系相關產(chǎn)品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
BLO-11細胞系相關產(chǎn)品：3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞
HCC1500細胞系相關產(chǎn)品：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
U2932細胞系相關產(chǎn)品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
293S細胞系相關產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
WiDr/S細胞系相關產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
SNT-8細胞系相關產(chǎn)品：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
Capan1細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞
RPMI no. 8226細胞系相關產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
HCC-1588細胞系相關產(chǎn)品：H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
Hs-27細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
Hs 606細胞系相關產(chǎn)品：L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
MCF12A細胞系相關產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
SUIT2細胞系相關產(chǎn)品：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
HAC-84細胞系相關產(chǎn)品：Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
Sup T-1細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
Panc327細胞系相關產(chǎn)品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞
H1105細胞系相關產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
MDA-157細胞系相關產(chǎn)品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
NTC-200細胞系相關產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
CD 18細胞系相關產(chǎn)品：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
NCI-H1781細胞系相關產(chǎn)品：253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞
WIL2-S細胞系相關產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
Hos TE-85細胞系相關產(chǎn)品：MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞
HEC-1-A Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
IMR 32細胞系相關產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
Scott細胞系相關產(chǎn)品：GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
Scott細胞系相關產(chǎn)品：GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
LL2細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
BT549細胞系相關產(chǎn)品：HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
Glioma 261細胞系相關產(chǎn)品：A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞
CWR22-R1細胞系相關產(chǎn)品：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
LC-2/ad細胞系相關產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
A 72細胞系相關產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
OCI/AML3細胞系相關產(chǎn)品：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
HPBALL細胞系相關產(chǎn)品：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞
"