"AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系
細胞背景資料：AN３CA細胞建系于１９６４年。它衍生于子宮內(nèi)膜癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織，具有癌細胞的基本特性，能在體外長期傳代培養(yǎng)，接種實驗動物產(chǎn)生明顯腫瘤。但細胞的生物學(xué)特性及超微結(jié)構(gòu)尚未深入研究，僅發(fā)現(xiàn)該細胞系促黑激素合成為陰性。細胞常用于人子宮內(nèi)膜癌細胞生物學(xué)及其相關(guān)特性研究。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
TE-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
NBL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
HOS-TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞
SK-MEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
COLO 320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26WT細胞、Rin-M-5F細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B/C3T3細胞、373 MG細胞、HEK AD293細胞
NW38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
MDA-MB-435 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
CHO-ori細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
SK-MEL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
BE2-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
BEL7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CAL33細胞
HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
NIHOVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
FCCH1018細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞
HCEC-B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
FCCH1018細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞
MOLT 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞
rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
EOL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
KE39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
Reh細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA922細胞、BT-474細胞、FHs74 Int細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
NCI-SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞
MTC-TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
SK-ChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞
TE 32.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞
KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系
HCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2B細胞、LAD-2細胞、Hs706T細胞
NCI-H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
NCI-H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞
WERI-Rb 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
DoTc2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
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