"TE-1 Thawing人食管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
TE-1 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長:貼壁
細胞接收操作說明:請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用,懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多,當然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞,但是,長期經驗來說,貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計是細胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴重的,會導致細胞死亡等危險),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TE-1 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時也將細胞數(shù)量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶?!静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS);2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分裝于15 ml無菌離心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃水槽回溫;3)新鮮培養(yǎng)基;4)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】1)預熱培養(yǎng)用液:把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱;2)用75%酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染;4)點燃酒精燈:注意火焰不能太?。唬?準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶;6)取出預熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內;7)從培養(yǎng)箱內取出細胞:注意取出細胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細胞;8)打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時要在酒精燈上燒口消毒。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
OCI-AML4細胞系相關產品:HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
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H-1876細胞系相關產品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關產品:PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
CCD-841-CoTr細胞系相關產品:MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞
A549/ATCC細胞系相關產品:DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞
HT144mel細胞系相關產品:MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞
HFE-145細胞系相關產品:VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
DAKIKI Clone 1細胞系相關產品:A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
G361mel細胞系相關產品:VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
PL-5細胞系相關產品:CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
RGC-6細胞系相關產品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
SHP77細胞系相關產品:HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
A-72細胞系相關產品:MDA-157細胞、aTC1 Clone 6細胞、NU-GC-4細胞
IM-95細胞系相關產品:A-204細胞、HA細胞、GM 637細胞
CTLL(2)細胞系相關產品:KU-19-19細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、OUMS-27細胞
CAL148細胞系相關產品:Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞
LM3細胞系相關產品:HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
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Tca8113細胞系相關產品:Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞
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TE-1 Thawing人食管癌細胞系
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Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關產品:SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
hFOB 1.19細胞系相關產品:HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
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BHK細胞系相關產品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞
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Nthy-ori 3-1細胞系相關產品:Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
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