"624-mel Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代24h-48h處于對數期的細胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細胞沉淀；用血清重懸細胞沉淀，用血球計數板或者細胞計數儀進行細胞計數；配制細胞凍存液，將凍存液加到細胞液中，吹打混勻，控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記好的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內細胞數目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳，會嚴重影響復蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數生長期的細胞進行凍存，凍存前一天細胞進行換液；消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復蘇的活率；凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作，會嚴重影響細胞活率。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
624-mel Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關產品：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
2E8細胞系相關產品：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
Hs870T細胞系相關產品：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
Lu-165細胞系相關產品：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞
GM2131細胞系相關產品：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
HPAF-II細胞系相關產品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
細胞生長特性：貼壁
624-mel Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟：１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２-５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數板計數后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２-３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
NK92細胞系相關產品：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
RIN14B細胞系相關產品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
HCC 38細胞系相關產品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
AU-Mel細胞系相關產品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
MCF.10A細胞系相關產品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
K562/ADR細胞系相關產品：LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關產品：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
C4-2B細胞系相關產品：H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
Panc813細胞系相關產品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
SK-N-SH細胞系相關產品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
H-508細胞系相關產品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
MIA-PaCa-2細胞系相關產品：Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
VP229細胞系相關產品：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
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LN-229細胞系相關產品：RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞
BC-027細胞系相關產品：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
MT2細胞系相關產品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
MT2細胞系相關產品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
MHH-CALL2細胞系相關產品：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞
LTEP-sm細胞系相關產品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
CCD-33Co細胞系相關產品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
V-79細胞系相關產品：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
SUNE1細胞系相關產品：GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
Hep2細胞系相關產品：H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
C666-1細胞系相關產品：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
Jiyoye細胞系相關產品：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
Ramos細胞系相關產品：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
HEC-1B細胞系相關產品：HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
NCIH1435細胞系相關產品：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
HCC2935細胞系相關產品：GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
SUM-52細胞系相關產品：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
H-1650細胞系相關產品：IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
Caco-2BBe細胞系相關產品：SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞
2PK3細胞系相關產品：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
A704細胞系相關產品：VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
MDA 435細胞系相關產品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
NCI-H157細胞系相關產品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
HCC44細胞系相關產品：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
H209細胞系相關產品：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
MDA436細胞系相關產品：UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關產品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
VMRC-LCD細胞系相關產品：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
NCI-H-295細胞系相關產品：KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞
GC-2細胞系相關產品：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞系相關產品：PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞
T24(ECV304)細胞系相關產品：Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
IAR20細胞系相關產品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
Hs940.T細胞系相關產品：293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
HEK/EBNA細胞系相關產品：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞
ZR75-1細胞系相關產品：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
TE-1細胞系相關產品：OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞
NCIH2073細胞系相關產品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
P388細胞系相關產品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
BEAS2B細胞系相關產品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
NR8383.1細胞系相關產品：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
H-446細胞系相關產品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
624-mel Adherent人黑色素瘤細胞系
HT-144細胞系相關產品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
TF-1細胞系相關產品：Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞
A2058細胞系相關產品：SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
18G3.cl 1細胞系相關產品：SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
U-138 MG細胞系相關產品：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
MCA-38細胞系相關產品：MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞
A3細胞系相關產品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
B16/F1細胞系相關產品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
MDA-MB 361細胞系相關產品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
SK-ES細胞系相關產品：LK 2細胞、UMNSAH/DF#1細胞、B958細胞
CaEs17細胞系相關產品：X63Ag8-653細胞、JurkatE6-1細胞、Panc 05.04細胞
HCC 2185細胞系相關產品：H-1930細胞、QSG7701細胞、Ha Fe細胞
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