"DOK Adherent人口腔黏膜癌前病變細胞系
細胞背景資料：口腔異常增生；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DOK Adherent人口腔黏膜癌前病變細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞
COLO 394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
Rat1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
細胞生長特性：貼壁
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
OVCAR.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
H-1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
U2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
HPaSteC(HPSC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H-10T1/2細胞、MyLa 2059細胞、HEL-92細胞
GM05887細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞
HCT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
BNL.CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
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LN229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞
LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
no-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
C1R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞
SK UT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
PANC-10-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞
HEK293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
HSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
CL1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
SBC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
CT26WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
H-2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
Eca109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
P3X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞
KE39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
Hs 819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
NCIN87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
CTX TNA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
SK-N-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
MC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
GP5d細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
50.B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞
J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞
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NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
L2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D562細胞、TALL-104細胞、NPC-TW 039細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
TE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞
KNS42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
SCC 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
H-2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kelly細胞、HUC-1細胞、CMT64細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細胞、S37細胞、B16 F1細胞
Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA175細胞、BLO 11細胞、NCIH28細胞
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