"HARA-B epithelioid cells人肺癌鱗癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
細胞生長：貼壁
HARA-B epithelioid cells人肺癌鱗癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞
Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞
A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HARA-B epithelioid cells人肺癌鱗癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞
L-428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
G 401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
WiDrTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
HARA-B epithelioid cells人肺癌鱗癌細胞系
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
UACC 893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
KU1919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞
Panc-05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
RPE-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
HUCCT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
NCI-A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
MCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
He-La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
LN 382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
COLO 678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
CCD-18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS513細胞、293T/17細胞、HSC-4細胞
Panc04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
LS174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
HARA-B epithelioid cells人肺癌鱗癌細胞系
M-G63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
NTERA2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、4175細胞、Mouse podocyte細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26WT細胞、Rin-M-5F細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細胞、TE-7細胞、DoTc2細胞
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