"TGW Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TGW Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
細胞生長特性:貼壁生長
TGW Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:神經(jīng)元細胞
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
P3-X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
OVISE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞
TCam 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
NCIH2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞
TGW Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
L 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
SCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
OE-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
P30/OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞
H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞
SK-N-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞
HCT.116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
S-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
MHCC 97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞
UCLA-SO-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞
NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
KYSE-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
AG 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞
PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
CHG-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
Mv1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
TGW Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
CHO-ori細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
HT55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
SW-1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、BLO-11細胞、HOPC細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細胞、NRK49F細胞、BALB/3T3細胞
IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH7777細胞、H2172細胞、143B TK-細胞
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