"EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細胞癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
NIH 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
GM02219D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細胞癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞
RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
SF 763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
IPI-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
NCI-H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
Colon-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞
T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細胞癌細胞系
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
A375S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
A375S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
Ra #1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
NCI-H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
NCI-H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
UCLA-RO 81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞
Mono Mac 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
BC-022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL-4細胞、COLO 206F細胞、RPMI-7666細胞
Hs832T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
SW480細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞
HCE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞
SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
EA hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
SVEC4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞
HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
SNU-638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞
H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
ACC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞
MDAMB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細胞癌細胞系
CAL 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
A2780/Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
RBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細胞、CRFK細胞、LL2細胞
MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、SK-RC-39細胞、GRSL細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細胞、HCC-1599細胞、TOG細胞
"