"WPMY-1 Adherent人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞系
細胞背景資料：肌成纖維基質(zhì)細胞株,WPMY-１,與RWPE-１cells(ATCCCRL-１１６０９)一樣，來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細胞。通過一個pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu)，用SV４０大T抗原對基質(zhì)細胞進行永生化。WPMY-１細胞，與RWPE-１細胞及其它上皮細胞衍生株一樣，屬于來源于同一個前列腺的一系列細胞株。由于它們來源于同一個前列腺的周圍區(qū)域，WPMY-１細胞株對于研究分泌和基質(zhì)與上皮細胞相互作用尤其有用。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
WPMY-1 Adherent人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
Duck embryo細胞系相關產(chǎn)品：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
NIH3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
YH-13細胞系相關產(chǎn)品：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OAW 42細胞系相關產(chǎn)品：RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
H-2330細胞系相關產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
BT474細胞系相關產(chǎn)品：H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞
細胞生長特性：貼壁生長
WPMY-1 Adherent人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞系
細胞形態(tài)特性：成肌細胞
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
TE4細胞系相關產(chǎn)品：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
BEAS 2B細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
H358細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
Panc_08_13細胞系相關產(chǎn)品：CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞
PAa細胞系相關產(chǎn)品：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
NCI-H1694細胞系相關產(chǎn)品：H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
H-1417細胞系相關產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
H-1836細胞系相關產(chǎn)品：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
624 MEL細胞系相關產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
NCIH1819細胞系相關產(chǎn)品：CW2細胞、SUM52PE細胞、SVEC 4-10細胞
MHCC97H細胞系相關產(chǎn)品：Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
293T/17細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
SUM-52細胞系相關產(chǎn)品：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
WPMY-1 Adherent人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞系
ES2細胞系相關產(chǎn)品：OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
CCD-18Co細胞系相關產(chǎn)品：TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞
MLMEC細胞系相關產(chǎn)品：U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
EOL1細胞系相關產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
A-427細胞系相關產(chǎn)品：D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
Kit 225-K6細胞系相關產(chǎn)品：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
MADB 106細胞系相關產(chǎn)品：HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞
L-540細胞系相關產(chǎn)品：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
R 2 C細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
HEL-299細胞系相關產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
Mink細胞系相關產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
WM266-4細胞系相關產(chǎn)品：MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關產(chǎn)品：QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
P30/Ohkubo細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
RGCs細胞系相關產(chǎn)品：SK-MES-1細胞、C81-61細胞、3T6 Swiss Albino細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關產(chǎn)品：COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
HL1細胞系相關產(chǎn)品：EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
BXPC3細胞系相關產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
SCH細胞系相關產(chǎn)品：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
MC3T3E1細胞系相關產(chǎn)品：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞
HCC0202細胞系相關產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
MAC1細胞系相關產(chǎn)品：MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
HSF細胞系相關產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
HLF-a細胞系相關產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
NCIH1385細胞系相關產(chǎn)品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
FHCRC-11細胞系相關產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
CEMO-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞
H2106細胞系相關產(chǎn)品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
RN-c細胞系相關產(chǎn)品：BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
J-774A.1細胞系相關產(chǎn)品：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
A-253細胞系相關產(chǎn)品：RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
MFC細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞
MCF7-CTRL細胞系相關產(chǎn)品：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
Hs 832(C).T細胞系相關產(chǎn)品：H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
8305C_1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
R1610細胞系相關產(chǎn)品：H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
H-1373細胞系相關產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
OACP4 C細胞系相關產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
L cells細胞系相關產(chǎn)品：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
WPMY-1 Adherent人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞系
NCIH740細胞系相關產(chǎn)品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
RPE1-hTERT細胞系相關產(chǎn)品：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
LIM1215細胞系相關產(chǎn)品：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞
Renal Carcinoma細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞
H-220細胞系相關產(chǎn)品：Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞
SVGp12細胞系相關產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
JOSK-M細胞系相關產(chǎn)品：SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞
REC 1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
BT-474細胞系相關產(chǎn)品：T-47-D細胞、MRAEC細胞、HCC38細胞
U-CH1細胞系相關產(chǎn)品：CAL33細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CCRF/CEM/0細胞
H35 Reuber細胞系相關產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、H4IIEC3細胞
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