"KMY1022 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
細胞背景資料：B淋巴細胞；EBV轉(zhuǎn)化
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
KCL22S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細胞、UM2細胞、LU-65M細胞
A2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
細胞生長：懸浮
KMY1022 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
Rat Fetal Lung-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞
NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KMY1022 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
Anglne細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
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A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
BCaP-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞
LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
BEL/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
SUM159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
NCI-H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
Rabbit Kidney 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
HEK293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞
WEHI 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
MSTO-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞
HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
RGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
UMRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
hTERT-HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
OE-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
CAL 85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
UMRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
HPDEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞
JHH-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞
SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
hOMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
MCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞
KMY1022 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細胞、BrCL15細胞、WC00059細胞
MDAPC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細胞、R1800[RA]細胞、SuDHL 5細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、MNNGHOS細胞、GM00346B細胞
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