"KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細胞系 細胞背景資料:慢性髓白血病;女性 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞 WTRL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞 LCLC103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞 細胞生長:懸浮 KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞 H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞 D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞 NRK clone 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞 NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細胞系 細胞生長特性:懸浮 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 16HBE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞 NCIH1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞 J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞 SK-BR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞 SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞 HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞 SF763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞 SW-626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3 M細胞、TALL 1細胞、SK-N-BE(2)細胞 EJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa-RG細胞、SNT8細胞、CORL105細胞 Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞 KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細胞系 NCIH2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞 OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞 8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞 CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞 HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞 Calu 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細胞、H220細胞、K299細胞 Calu 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細胞、H220細胞、K299細胞 SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞 HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞 BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞 HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞 Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞 SK.MEL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞 VK2 (E6/E7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞 KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞 MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞 OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞 YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞 FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞 TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞 HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞 C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞 P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞 OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞 NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞 CCF-STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞 MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞 NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞 NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞 B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞 LC1/Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞 HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞 H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞 CAL 85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞 NCI-H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞 SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞 BV-173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞 Panc05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞 Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞 NF639細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞 MeSoTheliOma-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞 HCET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞 RPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞 Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞 Danio rerio Gill細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞 MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞 B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞 MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞 T98-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞 L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞 NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞 KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細胞系 PANC-04-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞 KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1.S細胞、A-2780細胞、EM-3細胞 SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細胞、NCI-H2172細胞、TE10細胞 J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、SK-N-BE(2)細胞 "
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