"EHEB Lymphoblastoid cells人慢性B細胞白血病細胞系 細胞背景資料:B細胞白血??;女性 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! MAVER1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞 S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞 Ca9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞 細胞生長:懸浮 EHEB Lymphoblastoid cells人慢性B細胞白血病細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞 OE-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞 RAW2647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞 COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞 GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 EHEB Lymphoblastoid cells人慢性B細胞白血病細胞系 細胞生長特性:懸浮 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞 RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞 OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞 32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞 PC3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞 SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞 HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞 Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞 KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞 Calu 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細胞、H220細胞、K299細胞 EHEB Lymphoblastoid cells人慢性B細胞白血病細胞系 H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞 HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞 MKN 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞 H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞 32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞 NCI-H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞 NCI-H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞 NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞 MHH-CALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞 LK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞 Human Embryonic Kidney 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞 D-341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞 GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞 C6661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞 SKLMS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞 BT-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞 EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞 HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞 OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞 MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞 AdHek細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞 SW1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞 EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞 NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞 RBMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞 Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞 PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞 CHP-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞 H-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞 Tu 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞 U-251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞 Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞 Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞 U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞 IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞 HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞 RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞 HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞 L-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞 H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞 COLO 320F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞 Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞 alpha TC1 clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞 RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞 EB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞 HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞 PIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞 MCA205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞 Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞 MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞 6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞 EHEB Lymphoblastoid cells人慢性B細胞白血病細胞系 P30/OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞 MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5細胞、H920細胞、Hs-281-T細胞 SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細胞、UMR106細胞、CEF細胞 OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、NCI N87細胞、SW1463細胞 "
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