"JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套細胞淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：一位套細胞淋巴瘤患者的巨細胞變種顯示白血病轉變，從其外周血單核細胞出發(fā)建立了MCL細胞株JeKo-１。 JeKo-１細胞EB病毒陰性，并表達一種B細胞表型的IgM。 細胞過表達cyclin D１, Bcl-２, c-Myc 及 Rb 蛋白。 Bcl-１/J(H)基因重排得到了PCR證實。 JeKo-１細胞在SCID小鼠中高成瘤。 [PubMed: ９７５３０６３]
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
KYSE 270細胞系相關產(chǎn)品：HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞
MO59J細胞系相關產(chǎn)品：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
32D.3細胞系相關產(chǎn)品：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
細胞生長：懸浮
JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套細胞淋巴瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２傳代。３天內(nèi)可長滿。
NCI-H226細胞系相關產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
COLO-320-DM細胞系相關產(chǎn)品：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞
UMC11細胞系相關產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
Mink Lung細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
Farage OL細胞系相關產(chǎn)品：F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套細胞淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
N-9細胞系相關產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
HNTEC細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
CWR22-R1細胞系相關產(chǎn)品：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
KYSE270細胞系相關產(chǎn)品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
SH-SY5Y Parental細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關產(chǎn)品：SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
A-9細胞系相關產(chǎn)品：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
CMT167細胞系相關產(chǎn)品：NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
OE-21細胞系相關產(chǎn)品：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
HTori3細胞系相關產(chǎn)品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套細胞淋巴瘤細胞系
ATDC5細胞系相關產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
T-98G細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
Hs445細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
Detroit 562細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產(chǎn)品：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
VeroC1008細胞系相關產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞
Panc327細胞系相關產(chǎn)品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞
HRIF細胞系相關產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
NCI-H1975細胞系相關產(chǎn)品：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
MDA361細胞系相關產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
HLE B-3細胞系相關產(chǎn)品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Ly1細胞、CZ-1細胞
NCI-H1395細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞
Hs 695T細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
U-373-MG細胞系相關產(chǎn)品：MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞
HN-6細胞系相關產(chǎn)品：ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
H4-IIE-C3細胞系相關產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
SU-DHL6細胞系相關產(chǎn)品：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
CLONE M3細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
SW839細胞系相關產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
OAW 42細胞系相關產(chǎn)品：RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
L(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
AKR細胞系相關產(chǎn)品：PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
CMT-167細胞系相關產(chǎn)品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
SW 579細胞系相關產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
HuNS1細胞系相關產(chǎn)品：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
YES-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞
Hs683T細胞系相關產(chǎn)品：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞
KE-39細胞系相關產(chǎn)品：Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
H-187細胞系相關產(chǎn)品：Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞
MCF/Adr細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
Hs 934.T細胞系相關產(chǎn)品：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
TOV21細胞系相關產(chǎn)品：H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
KGN細胞系相關產(chǎn)品：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
QBI-HEK 293A細胞系相關產(chǎn)品：EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞
RPMI-1788細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
CWR22R-V1細胞系相關產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
CAOV4細胞系相關產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
MES13細胞系相關產(chǎn)品：FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
IGR-OV1細胞系相關產(chǎn)品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
CP70細胞系相關產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
OCI-Ly19細胞系相關產(chǎn)品：T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
SNU368細胞系相關產(chǎn)品：NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
H650細胞系相關產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
OCUM-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞
Walker-Ca.256細胞系相關產(chǎn)品：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
SK-N-MC細胞系相關產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
PG-4細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
NCI-A549細胞系相關產(chǎn)品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
MDCK Type II細胞系相關產(chǎn)品：LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
SUDHL-4細胞系相關產(chǎn)品：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
H-1993細胞系相關產(chǎn)品：Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞
JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套細胞淋巴瘤細胞系
NS-1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
293 c18細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-668細胞、C666-1細胞、NCI H226細胞
KP4細胞系相關產(chǎn)品：NS653細胞、OC 316細胞、Hs-578Bst細胞
CWR22-R1細胞系相關產(chǎn)品：Bat lung細胞、H125細胞、M-NFS-60細胞
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