"HPAF fibroblast cells人肺動脈成纖維細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
細胞生長：貼壁
HPAF fibroblast cells人肺動脈成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
MKN-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞
NCI-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細胞、He La細胞、TE14細胞
PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HPAF fibroblast cells人肺動脈成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
NCIH1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
Hs-578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
SK-CO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
GL-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
HPAF fibroblast cells人肺動脈成纖維細胞系
GM05887A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞
GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
SKRC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
NCI-H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
NALM-6-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
H-716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
VB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
H2.35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
NCIH2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
KU.812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞
HS-294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞
NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
HPAF fibroblast cells人肺動脈成纖維細胞系
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細胞、SW962細胞、AX-Mel細胞
MN 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H719細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、MDCK Type II細胞
HS578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-468細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、JF305細胞
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