"BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞背景資料：胚胎；成纖維；自發(fā)永生；雄性；BALB/c
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
細胞生長：貼壁
BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞
HDQP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Colon26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE­8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
H283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 Bl細胞、beta TC6細胞、Gerner 7666細胞
COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞
H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
BLO-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞
HEK-293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
UCLA RO-81A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、Hep3B細胞、M14-MEL細胞
MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
CEM-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
PC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞
BGC-823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞
8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
NCIH1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
ARO-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
Hi-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細胞、UM2細胞、LU-65M細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
H1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞
PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
P3 88 D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
COLO-824細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
OC-316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
SKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞
T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
HIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 600.T細胞、DoHH-2細胞、CCRF.CEM細胞
HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
TCam-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞
BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細胞、SCC-25細胞、SuperTube細胞
H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細胞、H-2009細胞、TALL1細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC823細胞、T/G HA-VSMC細胞、Capan 1細胞
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