"MuM-2C epithelioid cells人眼脈絡黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:脈絡膜;黑色素瘤 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! NCI.H460細胞系相關產品:THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞 ONS76細胞系相關產品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞 TE 85.T細胞系相關產品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞 細胞生長:貼壁 MuM-2C epithelioid cells人眼脈絡黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hs 888.Lu細胞系相關產品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞 Mhh-Call 2細胞系相關產品:GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞 COS7細胞系相關產品:BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞 SNU-C1細胞系相關產品:NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞 KMS-11細胞系相關產品:NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 MuM-2C epithelioid cells人眼脈絡黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 Hs 578T細胞系相關產品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞 DMS79細胞系相關產品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞 Verda reno細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞 OVCAR.3細胞系相關產品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞 KBM5細胞系相關產品:KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞 NCM-460細胞系相關產品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞 HCT 15細胞系相關產品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞 WERIRb1細胞系相關產品:Clone 15 HL-60細胞、HCC0070細胞、Ly18細胞 Ramos-2G6-4C10細胞系相關產品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞 RH35細胞系相關產品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞 MuM-2C epithelioid cells人眼脈絡黑色素瘤細胞系 JB 6細胞系相關產品:H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞 mREC細胞系相關產品:SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞 CHP 126細胞系相關產品:H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞 B-CPAP細胞系相關產品:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞 H-1436細胞系相關產品:PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞 HT22細胞系相關產品:Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞 HT22細胞系相關產品:Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞 NCI-H-82細胞系相關產品:BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞 HSAS1細胞系相關產品:hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞 CCD-841-CoTr細胞系相關產品:MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞 GM-215細胞系相關產品:H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞 108CC15細胞系相關產品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞 H-441細胞系相關產品:769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞 SK-UT-1細胞系相關產品:TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞 C3H 10T1/2細胞系相關產品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞 hTERTHME1細胞系相關產品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞 H1650_CO細胞系相關產品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞 Calu 3細胞系相關產品:MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞 GM00637I細胞系相關產品:NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞 CCLP-1細胞系相關產品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞 NCIH1184細胞系相關產品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞 SN-12C細胞系相關產品:BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞 NCIH2081細胞系相關產品:74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞 F442-A細胞系相關產品:MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞 Psi2 DAP細胞系相關產品:NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞 SK Col 1細胞系相關產品:KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞 MFE-280細胞系相關產品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞 RMa-bm細胞系相關產品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞 CWR22R細胞系相關產品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞 VSC4.1細胞系相關產品:UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞 CT26WT細胞系相關產品:RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞 IMR-32細胞系相關產品:BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞 D-407細胞系相關產品:HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞 Mac-1細胞系相關產品:U87細胞、SNU761細胞、3396細胞 KYSE180細胞系相關產品:RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞 DMS79細胞系相關產品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞 AML193細胞系相關產品:NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞 BCAP37細胞系相關產品:HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞 BCAP37細胞系相關產品:HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞 AsPC-1細胞系相關產品:MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞 McCoy細胞系相關產品:NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞 A375細胞系相關產品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞 SNU-719細胞系相關產品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞 H-2228細胞系相關產品:VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞 PE/CA-PJ-34細胞系相關產品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞 SK MEL-28細胞系相關產品:Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞 H-2009細胞系相關產品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞 HRC-99細胞系相關產品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞 B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關產品:C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞 SF126細胞系相關產品:KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞 Bac1 2F5細胞系相關產品:X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞 MuM-2C epithelioid cells人眼脈絡黑色素瘤細胞系 OVCAR8/ADR細胞系相關產品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞 PANC-03-27細胞系相關產品:hTERT-HME-1細胞、WERI-Rb1細胞、SK-MEL-5細胞 HuCC-T1細胞系相關產品:HOP 62細胞、SNU-878細胞、SUM 52PE細胞 Verda reno細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、AN3細胞、RPMI2650細胞 "
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