"MKN74 epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞背景資料:胃癌;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 L M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞 NK62a細胞系相關產(chǎn)品:OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞 MN60細胞系相關產(chǎn)品:COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞 細胞生長:貼壁 MKN74 epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 OVCA-420細胞系相關產(chǎn)品:RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞 HSC細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞 alpha TC1.6細胞系相關產(chǎn)品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞 DHL-4細胞系相關產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞 IPEC-1細胞系相關產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MKN74 epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 L5178-R細胞系相關產(chǎn)品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞 BJ1細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞 OV 1063細胞系相關產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞 PBMC細胞系相關產(chǎn)品:kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞 COLO 679細胞系相關產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞 95D細胞系相關產(chǎn)品:OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞 AM38細胞系相關產(chǎn)品:RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞 COLO 320 HSR細胞系相關產(chǎn)品:DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關產(chǎn)品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞 VMCUB1細胞系相關產(chǎn)品:H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞 MKN74 epithelioid cells人胃癌細胞系 HPAF II細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞 NUGC3細胞系相關產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞 COS-1細胞系相關產(chǎn)品:OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞 EA.Hy926細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞 COV362細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞 ATDC5細胞系相關產(chǎn)品:L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞 ATDC5細胞系相關產(chǎn)品:L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞 OVCAR433細胞系相關產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞 SKM1細胞系相關產(chǎn)品:QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞 C8-D1A細胞系相關產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞 Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關產(chǎn)品:SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞 C6661細胞系相關產(chǎn)品:MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞 ISHI細胞系相關產(chǎn)品:SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞 TALL 1細胞系相關產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞 MMAc.SF細胞系相關產(chǎn)品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞 COV 504細胞系相關產(chǎn)品:HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞 MMQ細胞系相關產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞 MUM2B細胞系相關產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞 H1573細胞系相關產(chǎn)品:HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞 SMMC7721細胞系相關產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞 Mouse Podocyte Clone-5細胞系相關產(chǎn)品:DSL-6A/C1細胞、HCEC-12細胞、U-251細胞 RAW264細胞系相關產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞 LLC-MK-2細胞系相關產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞 SH-SY5Y細胞系相關產(chǎn)品:HMEC1細胞、COR L279細胞、ES-2細胞 SNUC2B細胞系相關產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞 IMCD3細胞系相關產(chǎn)品:P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞 HO-1-N-1細胞系相關產(chǎn)品:PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞 HuH-6細胞系相關產(chǎn)品:CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞 NCI-322細胞系相關產(chǎn)品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞 Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關產(chǎn)品:PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞 SNU1細胞系相關產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞 TC7細胞系相關產(chǎn)品:KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞 HEK293F細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞 HONE-1細胞系相關產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞 BALL1細胞系相關產(chǎn)品:Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞 KCL-22細胞系相關產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞 IALM細胞系相關產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 LIPF178C細胞系相關產(chǎn)品:NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞 COLO320DM細胞系相關產(chǎn)品:GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞 DMS-114細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞 MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關產(chǎn)品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞 SkChA-1細胞系相關產(chǎn)品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞 SkChA1細胞系相關產(chǎn)品:REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞 JG細胞系相關產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞 NCIH1781細胞系相關產(chǎn)品:Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞 SW1353細胞系相關產(chǎn)品:GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞 B4G12細胞系相關產(chǎn)品:MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞 OSKM-1細胞系相關產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞 P3X63 AG8-653細胞系相關產(chǎn)品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞 T-98細胞系相關產(chǎn)品:SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞 Hs 821.T細胞系相關產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞 MKN74 epithelioid cells人胃癌細胞系 SGC-7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞 H1238細胞系相關產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、Case 3細胞、293E細胞 H-295細胞系相關產(chǎn)品:RDES-1細胞、IHH-4細胞、D 407細胞 OV 1063細胞系相關產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細胞、SK-MES1細胞、IR 983F細胞 "
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