"B-3 epithelioid cells人晶狀體上皮細胞系
細胞背景資料：晶狀體；Ad１２-SV４０轉化；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
WIL2 Secreting細胞系相關產品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
DMS-79細胞系相關產品：U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
RK-13細胞系相關產品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
細胞生長：貼壁
B-3 epithelioid cells人晶狀體上皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Caco-2/BBe 1細胞系相關產品：SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
ST 486細胞系相關產品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
MES13細胞系相關產品：FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
OCILY3細胞系相關產品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
MHCC 97-L細胞系相關產品：CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
B-3 epithelioid cells人晶狀體上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
CAL-85-1細胞系相關產品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
BNCL2細胞系相關產品：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
H1404細胞系相關產品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
NIH/3T3細胞系相關產品：MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
293GP細胞系相關產品：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞
MDA-MB-361細胞系相關產品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
SKOV3細胞系相關產品：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
697細胞系相關產品：NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞
Farage細胞系相關產品：NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
TCC-PAN2細胞系相關產品：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞
B-3 epithelioid cells人晶狀體上皮細胞系
KRC Y細胞系相關產品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
746T細胞系相關產品：MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞
FRTL-5細胞系相關產品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
NCI-SNU-886細胞系相關產品：SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞
LS123細胞系相關產品：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
HSC3細胞系相關產品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
CAL-78細胞系相關產品：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
SJ-Rh 30細胞系相關產品：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
675T細胞系相關產品：L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
CHP 100細胞系相關產品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
NCI-H1568細胞系相關產品：MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
HT115細胞系相關產品：OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
NCIH1568細胞系相關產品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
Hep 3B細胞系相關產品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞
MDCK II細胞系相關產品：SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
OCI-AML-3細胞系相關產品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
DiFi細胞系相關產品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
BC3H-1細胞系相關產品：769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
149 PT細胞系相關產品：Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關產品：SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
HuP-T4細胞系相關產品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
BEL 7404細胞系相關產品：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
UMUC-14細胞系相關產品：HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞
HemECs細胞系相關產品：Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
MDA-MB-231細胞系相關產品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
190PT細胞系相關產品：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
NE-1細胞系相關產品：159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
Ramos(RA1)細胞系相關產品：IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
PANC-10-05細胞系相關產品：SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞
WB-F344細胞系相關產品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
NCI-HUT-460細胞系相關產品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
Panc 10.05細胞系相關產品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
HC-11細胞系相關產品：Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞
MN-9D細胞系相關產品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞
Daudi細胞系相關產品：SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
DU 145細胞系相關產品：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
H2172細胞系相關產品：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
NB19-RIKEN細胞系相關產品：MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
NPA細胞系相關產品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
NCIH1385細胞系相關產品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
HEC-1-A細胞系相關產品：WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
HGC27細胞系相關產品：SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
NTERA-2/D1細胞系相關產品：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
Tb1Lu細胞系相關產品：J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
H1436細胞系相關產品：Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
SW-1271細胞系相關產品：HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞
H292細胞系相關產品：SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
H19-7細胞系相關產品：GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞
LK 2細胞系相關產品：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關產品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
H2052_MM細胞系相關產品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
B-3 epithelioid cells人晶狀體上皮細胞系
NCI-H2110細胞系相關產品：E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關產品：MDCK細胞、NL-20細胞、CL-11細胞
HS5細胞系相關產品：huH 1細胞、SK-MES-1細胞、Clone 929細胞
H1395細胞系相關產品：MIO-M1細胞、BRL3A細胞、CT26.WT細胞
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