"GP5d epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞背景資料：結(jié)腸癌；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
hs 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
Mv 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
細胞生長：貼壁
GP5d epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SUM-159-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞
AN3-CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
RPMI8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33 A細胞、MDCC MSB1細胞、Rat 1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GP5d epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
P30/0HK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞
Kupffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
OCILY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
GP5d epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細胞系
MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞
MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
CAL 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞
MIHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
MIHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
SMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404A細胞、FRTL5細胞、Caki-2細胞
KRC/Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
TJ905細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞
A2780-CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
Hs688(A)T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
IMR32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
Kit-225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE­8.1/2細胞
H-1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
TE-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
Tissue Culture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
BT474細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
SMA560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
OVCAR420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
EA.Hy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
H-2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
GP5d epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細胞系
SUD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、Pa14C細胞
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、MEF (CF-1)細胞、NCIH1436細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、Murine Carcinoma-38細胞、Hk-2細胞
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