"LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細胞系
細胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
細胞生長：貼壁
LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Tu 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞
H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
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細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
BC-025細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細胞系
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
LS-513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
EnCa1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞
Chang Cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
HVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
Oregon J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞
NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
Sp2/O-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞
Hs695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
PANC3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
RKO-AS45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
GM2131細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
SHIN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
HCC366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
KU.812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞
Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
HGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細胞系
PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
U-118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH82細胞、BT 20細胞、HEK/EBNA細胞
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細胞、KU-812-F細胞、NCIH596細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細胞、NK 10a細胞、Tca-8113細胞
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