"KP-4 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管細胞癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞 U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞 McA-RH 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞 細胞生長:貼壁 KP-4 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管細胞癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2傳代 BAC1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞 C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞 P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞 NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞 Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 KP-4 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管細胞癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認(rèn)為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 MDA.MB.231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞 Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞 Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞 GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞 MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞 Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞 RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞 3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞 J-774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞 OLN 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞 KP-4 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管細胞癌細胞系 MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞 H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞 NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞 CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞 SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞 H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞 H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞 NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞 SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞 B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞 Swiss 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞 T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞 Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞 SK-MEL-2-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞 PK136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS60細胞、Vero-76細胞、Institute for Medical Research-90細胞 FaDu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞 SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞 HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞 LNCaP-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞 HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞 NCI-H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞 NBL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞 H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞 WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞 Rat Fetal Lung-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞 BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞 H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞 P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞 HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞 Tu-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞 IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞 SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞 JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞 BC-021細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞 B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞 H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞 MDST8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞 CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞 HEK293-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞 CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞 NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞 HCCC9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞 3AO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細胞、H711細胞、RN細胞 HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞 MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞 SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞 SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞 CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞 KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞 OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞 KP-4 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管細胞癌細胞系 SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞 MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA1細胞、CF-PAC1細胞、MSF細胞 LU451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細胞、32D.3細胞、JC細胞 Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細胞、EFM192B細胞、58F細胞 "
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