JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒
中文名稱:JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒
英文名稱:JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100tests(6孔板)
JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit)是一種以JC-1 為熒光探針,快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測(cè),也是用來檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的常用方法。 JC-1 是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針,JC-1染料以電勢(shì)依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不僅可用于定性檢測(cè),因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測(cè),因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來衡量。觀察時(shí),只需使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。 線粒體膜電勢(shì)的破壞是細(xì)胞凋亡早期發(fā)生的一個(gè)標(biāo)志性事件。細(xì)胞受到凋亡誘導(dǎo)后線粒體膜電位的變化使得膜的通透性發(fā)生改變。膜通透性的增加,使得線粒體蛋白包括細(xì)胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內(nèi)切酶G(EndoG)、凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)等從線粒體基質(zhì)釋放到細(xì)胞漿。細(xì)胞色素C的釋放伴隨膜電位的完全喪失,進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞凋亡酶的級(jí)聯(lián)效應(yīng)。 本試劑盒提供了CCCP 作為誘導(dǎo)線粒體膜電位下降的陽性對(duì)照。對(duì)于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)100 個(gè)樣品;對(duì)于12 孔中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)200 個(gè)樣品。 試劑盒組份:
儲(chǔ)存條件:20℃避光,盡量避免反復(fù)凍融,有效期一年 注意事項(xiàng) 1)JC-1(200×)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20~25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 2)必須先把JC-1(200×)用試劑盒提供的超純水充分溶解混勻后,才可以加入JC-1染色緩沖液(5×)。不可先配制JC-1染色緩沖液(1×)再加入JC-1(200×),這樣JC-1會(huì)很難充分溶解,會(huì)嚴(yán)重影響后續(xù)的檢測(cè)。 3)裝載完JC-1后用JC-1染色緩沖液(1×)洗滌時(shí),使JC-1染色緩沖液(1×)保持4℃左右,此時(shí)的洗滌效果較好。 4)JC-1探針裝載完并洗滌后盡量在30分鐘內(nèi)完成后續(xù)檢測(cè)。在檢測(cè)前需冰浴保存。 5)請(qǐng)勿把JC-1染色緩沖液(5×)全部配制成JC-1染色緩沖液(1×),本試劑盒使用過程中需直接使用JC-1染色緩沖液(5×)。 6)如果發(fā)現(xiàn)JC-1染色緩沖液(5×)中有沉淀,必須全部溶解后才能使用,為促進(jìn)溶解可以在37℃加熱。 7)CCCP為線粒體電子傳遞鏈抑制劑,有毒,請(qǐng)注意小心防護(hù)。
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