"CCD-33Co Cell:人結(jié)腸成纖維細胞系
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CCD-33Co Cell:人結(jié)腸成纖維細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCIH2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
CCD-33Co Cell:人結(jié)腸成纖維細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
CCD1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
NK10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
CCD-33Co Cell:人結(jié)腸成纖維細胞系
Nb2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
COS-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
MDA-MB-435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞
RINm5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞
IHH-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
Ramos G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
Hs888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
G-402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞
SN4741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
LED-WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細胞、H1404細胞、ARO-81細胞
TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
IPLB-SF-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
PK 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞
SNU739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
NCI-H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
RERF-LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
PLA801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞
U-138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
CCD-33Co Cell:人結(jié)腸成纖維細胞系
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
hFOB1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Helacyton gartleri細胞、IPLB-SF 21細胞、Ramos細胞
WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
OCI-LY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
SU 86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289細胞、Hs683T細胞、HUT28細胞
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