"HCC70 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
HOS-143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
細胞生長：貼壁
HCC70 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞
SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞
COLO 206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC70 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
PC-3/M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
MKN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞
UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
UMR-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
EPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞
COR-L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細胞、Caov-4細胞、HCC0015細胞
HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
HCC70 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
DMS 114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
P3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
NHDF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
HEY-A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
58F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
DSL-6A-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh 74細胞、SW-1271細胞、HMEC細胞
Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
OC-316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞
NCI H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
293 Ad5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
SV-HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
TO175T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
SR-786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
HCC70 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
IHH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞
H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8402細胞、TSCC1細胞、NCI-H2107細胞
NRK-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細胞、P388D1細胞、L Wnt-3A細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細胞、SNU-638細胞、NCI-H1993細胞
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