"Hs 683 epithelioid cells人腦膠質(zhì)瘤細胞系 細胞背景資料:該細胞源自76歲白人男性的左顳葉側(cè)膠質(zhì)瘤組織,有微絨毛,無橋粒。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞 UMNSAH-DF 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞 細胞生長:貼壁 Hs 683 epithelioid cells人腦膠質(zhì)瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:4傳代,每周換液2次 SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞 DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞 ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞 L-6 myoblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞 UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Hs 683 epithelioid cells人腦膠質(zhì)瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞 TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞 ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞 10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞 NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞 HCCC-9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞 H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞 CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞 UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞 ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞 Hs 683 epithelioid cells人腦膠質(zhì)瘤細胞系 Jurkat E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞 AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞 NCIH748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞 A704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞 Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞 G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞 mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞 PCI-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞 NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞 P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞 Bac12F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞 H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞 NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞 NCI-H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞 Meat Animal Research Center-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞 NCIH740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞 UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞 NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞 MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞 Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞 Calu 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞 NCIH820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞 DITNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞 H-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U937細胞、MV4II細胞、P388細胞 Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞 SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞 CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞 KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞 Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞 Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞 HS-445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞 YD15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞 LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞 PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞 MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞 P30/0HK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞 H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞 Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞 Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞 HEK293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞 H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞 HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞 LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞 PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞 LN229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞 FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞 NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞 LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞 MHCC97H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞 Hs 683 epithelioid cells人腦膠質(zhì)瘤細胞系 MHH-CALL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞 3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATHa細胞、38C13細胞、Caki-2細胞 NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細胞、SF126細胞、KMST-6細胞 ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Panc5.04細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞 "
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