"GI-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 MGH-UI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞 SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞 Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞 細胞生長:貼壁 GI-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2傳代 CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞 KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞 JB6 Cl 30-7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞 Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞 CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 GI-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞 SK-SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞 HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞 H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞 OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞 X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞 HO-8910 PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞 CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞 HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞 HOP-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞 GI-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系 293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞 A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞 AK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞 HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞 NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞 GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞 GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞 MTEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1833細胞、Vero 76 clone E6細胞、HS-294細胞 Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞 H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞 QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞 Toledo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞 L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞 H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞 Caco-2/BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞 MSTO-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞 SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞 CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞 MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞 Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞 SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞 PAI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞 IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞 2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞 Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞 H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞 CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞 Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞 HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞 H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞 FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞 U-251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞 Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞 Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞 HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞 CHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞 YES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞 SP2/0 Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞 COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞 PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞 VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞 NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞 AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞 786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞 WEHI-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞 CWR-22rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞 HRPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞 COLO320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞 FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞 ZR7530細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞 OCI Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDAMB436細胞、CESS細胞 GI-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系 CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細胞、WM-451Lu細胞、hMSC-BM細胞 87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888 Lu細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、MDA-MB-134 VI細胞 HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細胞、TF1細胞、Ramos 2G6.4C10細胞 "
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